内容摘要:
荧光原位杂交技(fish)原理:是利用荧光标记的特异核酸探针与细胞内相应的靶DNA分子或RNA分子杂交,通过在荧光显微镜或共聚焦激光扫描仪下观察荧光信号,来确定与特异探针杂交后被染色的细胞或细胞器的形态和分布,或者是结合了荧光探针的DNA区域或RNA分子在染色体或其他细胞器中的定位。 荧光原位杂交技(fish)实验步骤: 1、组织固定:组织取出洗净后立即放入固定液(DEPC水配制)中固定2-12h。 2、脱水:组织固定完成后经梯度酒精脱水后浸蜡,包埋。 3、切片:石蜡经切片机切片,摊片机捞片,62°烤箱烤片2h。 4、石蜡切片脱蜡至水:依次将切片放入二甲1苯Ⅰ 15min-二甲1苯Ⅱ 15min-无水乙醇Ⅰ 5min-无水乙醇Ⅱ 5min,风干,DEPC水浸泡。 5、消化:根据组织固定时间长短,分子病理技术服......
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