主营产品:原位杂交,亚细胞定位,蛋白互作,启动子筛选
内容摘要: 用水稻原生质体进行亚细胞定位时,为什么不拍摄叶绿体的自发荧光?经测验,使用水稻黄化苗制备原生质体,载体转化效率及基因表达强度较高,而黄化苗中叶绿体较少,因此水稻原生质体定位拍照时,除非与叶绿体共定位,否则不拍摄叶绿体的自发荧光。为什么要提供GFP空载的对照图片?(1)作为整个实验过程中的操作参照,可排除因实验操作而导致目的基因没有荧光信号的影响。(2)作为载体体系的参照,确认构建载体时所使用的载体是可正常表达荧光蛋白的。 为什么不先对基因做预测,在预测的结果上直接做共定位?不同的预测网站有不同的计算方法,同一个基因在不同的预测网站也可能得出不同的定位结果。另外所有的结果都应是基于实验得到的,对于不清楚可能定位在哪里的基因,一般推荐先做普通定位,根据普通定位的结果再决定做哪种细胞器的共定位。适用于什么实验场景?(1)基因功能研究,文章里总少不了这一项。(2)研究蛋白相互作用,双分子荧光互补,......
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