内容摘要:
原位杂交第二天1.1)将探针回收,放于-20C保存(通常探针可重复使用十次左右)。2)加入50%甲酰胺/2XSSCT溶液1毫升,60℃,放置30分钟,重复一次。3)置换2XSSCT1ml,60℃,放置15分钟。4)置换0.2XSSCT1ml,60℃,放置30分钟,重复一次。2.1)用MABT洗两次,每次五分钟,放在摇床轻轻摇动。2)室温下加1ml 1:2:7溶液,时间为一小时。3)按1:3000的比例在1:2:7溶液中加入酶连,4C 冰箱过夜。 菌落的裂解及DNA结合于纤维素滤膜(1) 在一张保鲜膜上制作一个装有0.5mol/L NaOH的小洼(0.75ml),动物组织原位杂交,使菌落面朝上,原位杂交试剂,将滤膜放到小洼上,展平保鲜膜,湖北原位杂交,使滤膜均匀湿润,让滤膜留于原处2-3分钟。(2) 用干纸巾从滤膜的下方吸干滤膜,用一张新的保鲜膜和新配制的0.5mol/L Na......
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