内容摘要:
基因法转化洋葱表皮细胞:分别用70%乙醇和灭菌蒸馏水清洗金粉(直径为1 μm),加入灭菌蒸馏水制成金粉悬浮液,取100 μL 放在含有1.0 cm2 洋葱表皮的玻璃皿中,边振荡边加入10 μL pCambia2301-GaMYB2-GFP质粒,逐步加入40 μL 0.1 mol·L-1 亚精胺和100 μL2.5 mol·L-1 CaCl2,振荡混匀。基因GDS-80轰击时氦气罐的气压为1 300 psi,取10 μL DNA 包裹好的微粒悬浮液加到基因,进行轰击,之后放置25℃避光过夜培养,使用ConfocalLaser激光共聚焦显微镜观察。 洋葱亚细胞定位的方法包括但不限于以下三种:荧光法:利用抗原与的特异性结合,在细胞内产生荧光标记,从而确定细胞内抗原的分布位置。GFP融合蛋白表达法:将目的蛋白与绿色荧光蛋白(GFP)融合,通过荧光显微镜观察绿色荧光蛋白的表达位置。亚细......
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