主营产品:原位杂交,亚细胞定位,蛋白互作,启动子筛选
内容摘要: 预杂交1)每个管中置换成大约300ulHYB-溶液,60℃水浴5分钟,避免振荡。2)用等体积的HYB+取代HYB-。3)60℃水浴,预杂交4小时以上。杂交1)吸去预杂交的HYB+,加上100ul已加入探针的HYB+溶液(探针浓度约为1ng/ul)..2)60℃ 温浴过夜。注:杂交与预杂交的温度可以是55到60度不等,温度越低,探针结合越好,原位杂交技术,温度越高,背景越小。 原位杂交技术方法大致可分为:1.杂交前准备,原位杂交,包括固定、取材、玻片和组织的处理,如何增强核酸探针的穿透性、减低背景染色等;2.杂交;3.杂交后处理;4.显示(visualization):包括性自显影和非性标记的显色。固定原位杂交组织化学技术在固定剂的应用和选择上应兼顾到三个方面:保持细胞结构,限度地保持细胞内DNA或RNA的水平;使探针易于进入细胞或组织。DNA是比较稳定的,mRNA是相对稳定的......
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