内容摘要:
三、自噬过程进行观察和检测1、观察自噬体的形成由于自噬体属于亚细胞结构,普通光镜下看不到,因此,直接观察自噬体需在透射电镜下。Phagophore的特征为:新月状或杯状,双层或多层膜,有包绕胞浆成分的趋势。自噬体(AV1 )的特征为:双层或多层膜的液泡状结构,内含胞浆成分,细胞实验外包,如线粒体、内质网、核糖体等。自噬溶酶体(AV2 )的特征为:单层膜,胞浆成分己降解。( autophagic vacuolo AV )2、在荧光显微镜下采用GFP-LC3融合蛋 白来示踪自噬形成由于电镜耗时长,不利于监测(Monitoring) 自噬形成,人们利用LC3在自噬形成过程中发生聚集的现象开发出了此技术。无自噬时,GFP-LC3融合蛋 白弥散在胞浆中;自噬形成时,GFP-LC3融合蛋白转 位至自噬体膜,在荧光显微镜下形成多个明亮的绿色荧光斑点,一个斑点相当于一个自噬体,细胞实验外包公司,可......
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