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北京中检维康生物技术有限公司






亲和柱——亲和层析的应用

抗原和利用抗原、之间高特异的亲和力而进行分离的方法又称为亲和层析。例如将抗原结合于亲和层析基质上,肝素亲和柱,就可以从中分离其对应的。在蛋白质工程菌发酵液中所需蛋白质的浓度通常较低,用离子交换、凝胶过滤等方法都难于进行分离,而亲和层析则是一种非常有效的方法。将所需蛋白质作为抗原,经动物后制备,将与适当基质偶联形成亲和吸附剂,就可以对发酵液中的所需蛋白质进行分离纯化。抗原、间亲和力一般比较强,肝素亲和柱厂家,其解离常数为108-1012M,所以洗脱时是比较困难的,通常需要较强烈的洗脱条件。可以采取适当的方法如改变抗原、种类或使用类似物等来降低二者的亲和力,以便于洗脱。

另外金黄色球菌蛋白A(ProteinA)能够与球蛋白G(IgG)结合,可以用于分离各种IgG。



亲和层析的产生背景

残留检测的确证方法主要是仪器分析法,如LC-MS、GC-MS或HPLC,这些方法中因残留组分量很小,检测方法需要较高灵敏度和准确性。样品前处理是检测技术的,肝素亲和柱公司,传统的样品净化技术主要有液—液分配(LLE)、固相萃取(SPE)、基质固相分散(MSPD)、超临界萃取(SFE)等。但是这些净化技术通常需要多个净化步骤,缺乏选择性,不但费时繁琐、容易污染、损失样本且会引起严重的本底干扰,降低结果的可靠性。因此建立有效的样本净化技术已成为痕量分析的主要问题。近20年,固相提取领域研究的不断深入,推进了从分析物中选择性萃取目标产物为目的的新技术发展(Hennion等,2003)。



双酚A检测新方法——亲和柱净化-液相色谱法

双酚A,也称BPA,在工业上被用来合成聚碳酸酯(PC)和环氧树脂等材料。许多科学家发现,双酚A会发挥类似雌素的作用扰乱人体内的代谢过程。。我国、欧盟、美国等都禁止其用于婴幼儿奶瓶。但目前对于双酚A的检测前处理仅有少量文献报道,均采用简单的萃取、浓缩或SPE固相萃取柱净化。中检维康研发团队将专一性强、稳定性高的层析技术应用于双酚A检测,力图简化样品前处理,提高检测灵敏度及净化效果。

双酚A亲和柱能够特异性的纯化样品中的双酚A,将样品溶液通过亲和柱时,双酚A键合在亲和柱中的上。用蒸馏水将杂质淋洗去除。将净化、浓缩后的双酚A从上分离下来。然后,注入HPLC或LC-MS进行测定。



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