对Nb11-59在体内其他对SARS-CoV-2是否具有特异性进行了关键性实验。昆明小鼠(雌性,18 ~ 20 g)气管内接种RBD 300 μg(以100 μL PBS为单位)或0.01 M PBS (100 μL),后腹腔注射4%水合氯醛0.2 mL。这种方法在前面中已经描述过。静脉注射68Ga-Nb1159 3h;接种后30分钟和60分钟在相同的方案指导下进行临床前PET成像扫描(p.i.)。比较RBD注射与0.01 M PBS注射小鼠肺SUVmax的差异。此外,以每小时60分钟的速度去除含RBD (75 μg)和PBS的肺。然后,小动物CT腰椎,对左肺和右肺进行体外临床前PET显像,用伽马计数器进行加权和计数。
样品的储存:
① 新鲜取出的器1官或骨组织样本去除血液,生理盐水漂洗,用中性4%的多聚甲醛或者10%的福尔1马林固定,使用合适尺寸的密封器皿储存,小动物CT,并用封口膜封好,室温保存。
② 固定液体积是组织体积的5倍以上,样本需完全被固定液浸没,装组织的密封器需比组织大(避免挤压影响组织形态),同一批样品保存容器及存储液一致,避免系统误差。
CT成像的原理是当X-射线透过样本时,样本的各个部位对X-射线的吸收率不同。X-射线源发射X-射线,穿透样本,终在X-射线检测器上成像。对样本进行180°以上的不同角度成像。通过计算机软件,将每个角度的图像进行重构,还原成在电脑中可分析的3D图像。通过软件观察样本内部的各个截面的信息;对样本感兴趣部分进行2D和3D的分析;还可以制作直观的3D动画等。
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