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ISH-原位杂交-贝科新肽科技公司高清图片 高清大图

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武汉贝科新肽科技有限公司

原位杂交技术在其他生物领域也有广泛的应用,例如:

植物学研究:在植物学研究中,植物组织原位杂交,原位杂交技术可以用于检测和定位特定基因的表达,研究基因组结构和进化。此外,动物组织原位杂交,还可以应用于植物染色体组型分析、基因组印记研究等方面。

微生物学研究:在微生物学领域,原位杂交技术可以用于研究细菌、病毒等微生物的基因表达和定位,以及它们在环境中的分布和相互作用。例如,通过标记特异性探针,可以检测肠道微生物群落中的特定,原位杂交,研究其在人体健康和疾病发生中的作用。


一. 原位杂交天

1. 重新水化和固定

1) 吸取固定好的胚胎,加入50%的PBST溶液,放置5分钟。

2) 置换成30%的PBST溶液,放置5分钟

3) 置换成PBST溶液,放置5分钟,重复一次

4) 置换成4%多聚甲醛的PBS溶液固定20分钟

5) 用PBST洗两次,每次放置五分钟,室温。

蛋白酶处理与后固定(本实验不做此步)

1) 用10ul/ml的蛋白酶K在室温下处理胚胎。5体节以下的胚胎不处理,5体节到24小时的胚胎处理3分钟,24小时以上的胚胎处理5分钟或者更长。发育时间越短的胚胎越嫩,可以不用或者少用蛋白酶处理,发育时间长的胚胎就需要用蛋白酶来疏松组织,以便于杂交。

2) 用PBST溶液轻洗,在PBST中放置5分钟。

3) 用4%多聚甲醛的PBS溶液固定20分钟,室温。

4) 用PBST洗两次,每次放置五分钟,室温。




把滤膜放在纸巾上于室温晾干后,把滤膜(编号面朝上)放在一张保鲜膜上,并在保鲜膜上作几个不对称的标记,以使滤膜与性自显影片位置对应。

用第二张保鲜膜盖住滤膜。加光片并加上增感屏于-70℃曝光12-16小时。

底片显影后,在底片上贴一张透明硬纸片。在纸上标记阳性杂交信号的位置,同时在不对称分布点的位置上作出标记。可从底片上取下透明纸,通过对比纸上的点与琼脂上的点来鉴定阳性菌落。


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