四环牌ME-压力蒸汽灭菌生物指示菌片
四环牌ME—压力蒸汽灭菌生物指示菌片是由嗜热脂肪杆菌(ATCC 7953)芽孢和滤纸片组成。菌片回收菌量为5．0X10 的五次方cfu／片•～5．0X10‘cfu／片。生物指示菌片的抗力符合和的规定：在121℃饱和蒸汽作用下，存活时间≥3．9 min，杀灭时间≤19 min，D值1．3 min～1．9 min。
(使用范围)适用于医疗卫生机构、制药工业和医院制剂生产等各行业使用的121℃下排气式压力蒸汽灭菌器、132℃～134℃预真空或脉动真空压力蒸汽灭菌器、134℃～136℃台式或卡式压力蒸汽灭菌器等各种型号的压力蒸汽灭菌器灭菌效果的监测。
(使用方法)1使用时，将用小纸袋包装好的菌片放在标准测试包的中心或物品包的中心。将放有菌片的物品包置于灭菌器内难消毒的位置按规定的灭菌温度和时间进行灭菌处理。检验同时设阳性对照菌片‘，阳性对照菌片放室温下，不进行灭菌处理。
2灭菌完毕，在无菌操作下取出小纸袋中的菌片，投放到溴甲酚紫恢复培养基管中。同时将未经灭菌的阳性对照菌片投入另一管恢复培养基中作阳性对照管。置于56℃恒温培养箱内或配套的微型培养器内培养24 h～48 h观察初步结果，无菌生长时应在第7 d观察终结果。
(结果判定)
培养后生物指示菌片培养管中的溴甲酚紫恢复培养基由紫色澄清液体变为黄色澄清液体即表示有菌生长，判定为灭菌不合格；恢复培养基仍为紫色澄清液体为无菌生长：同时阳性
对照管嗜热脂肪杆菌芽孢生长正常即恢复培养基由紫色澄清液体变为黄色澄清液体，判定为
灭菌合格。
(注意事项)
1恢复培养基的pH值应≥7．2但<7．5，pH值>7．5时，嗜热脂肪杆菌芽孢生长不良。
2培养温度须在56℃～60℃之间，否则可导致嗜热脂肪杆菌芽孢生长不良，或不能生长。
3灭菌处理后，生物指示剂中的恢复培养基颜色与压力蒸汽灭菌前比较会变浅，呈显浅
紫色，这种变化属正常现象。
4菌片被完全浸没于恢复培养基后，用手轻轻振摇，使菌片浸入培养液中，有利于存活
5用恢复培养基在56℃培养时间过长(72 h以上)，阳性对照管中培养液的黄色容易消退，培养液逐渐变干，应注意每天观察，随时记录培养结果。
6本生物指示剂于4℃条件下保存。
(有效期) 12个月。
(包装规格)50片／包
附：恢复性培养基的制备
(培养基配方)胰蛋白胨10 g、葡萄糖5 g、可溶性淀粉1 g、蒸馏水、2．0％溴甲酚紫
酒精溶液指示剂。
(配制方法)
胰蛋白胨10g，葡萄糖5g和可溶性淀粉1g溶解于1000ml蒸馏水中，调节pH至7．2～
7．4，加入2．0％溴甲酚紫酒精溶液10 ml，摇晃均匀后，分装(每管5 mi)，于115℃压力蒸汽灭菌30 min。置4℃冰箱内保存，备用。
2．0％溴甲酚紫酒精溶液的配制，取2．0 g溴甲酚紫加到98．4 ml 95％酒精溶液中摇匀即可。
(注意事项)防止指示剂中酒精挥发而使溴甲酚紫含量过高(溴甲酚紫含量过高后可抑
制菌生长)。
