凡用环氧乙烷灭菌的一次性注射器等器材的灭菌效果检测方法有生物指示剂检测和环氧乙烷化学灭菌指示卡两种方法。
环氧乙烷灭菌效果的生物指示剂为菌株枯草杆菌黑色变种芽孢(ATCC9372)。
特 性：
该菌为G兰氏阳性杆菌，极易形成芽孢，芽孢位于菌体，不膨大。芽孢染色为孔雀绿着色。在琼脂平皿菌落呈棕色并随培养时间延长菌落有黑色素生成着色。
生物指示剂（ATCC9372）：染菌量：5×105－5×106cfu/片
抗力：流通蒸汽：100℃4min
环氧乙烷：600±30mg/L 温度：54℃ 相对湿度：60%±10%
存活时间≥7.8min 死亡时间≤58min
D值为2.6－5.8min
使用方法：
1、该芽孢菌片适用于环氧乙烷（包括微波、干热）灭菌检测。
2、使用时将装有菌片的小纸袋放在被灭菌的物品中心部位（每锅放置菌片数按卫生部规定）。
3、灭菌后，在无菌操作下取出小纸袋中的菌片，投放到培养液中。同时将2片未经灭菌的菌片分别投入2管培养液中作对照。
4、37℃培养7天观察结果，对照管呈浑浊；若灭菌后菌片培养液呈清亮、无浑浊，为阴性（－），表示灭菌；如培养液呈浑浊，为阳性（+），表示灭菌不。
5、当出现阳性结果后，为确定是否为灭菌后接种操作过程中污染其他菌种时，可在无菌室内取0.2ml悬液接种营养琼脂平板用无菌L棒涂抹均匀，置37℃培养24h后，涂片显微镜下观察菌落形态或做进一步试验。
培养液成份和配制方法：
1、成 分：牛肉膏5g、蛋白胨10g、氯化钠5g、蒸馏水1000ml。
2、配制方法：
（1）把各种成分溶解后，调解pH7.0－7.2，摇匀；
（2）每管分装5ml，经121℃20min灭菌后，放4℃冰箱内保存，备用。
注意事项：
1、本生物指示剂应保存在4℃冰箱内，避免其它因素影响。
2、本生物指示剂在检验时可按卫生部“消毒技术规范”有关规定进行。
