亲和柱——亲和层析的应用
抗原和抗体利用抗原、抗体之间高特异的亲和力而进行分离的方法又称为亲和层析。例如将抗原结合于亲和层析基质上,就可以从中分离其对应的抗体。在蛋白质工程菌发酵液中所需蛋白质的浓度通常较低,用离子交换、凝胶过滤等方法都难于进行分离,维生素B12亲和柱哪家好,而亲和层析则是一种非常有效的方法。将所需蛋白质作为抗原,经动物后制备抗体,将抗体与适当基质偶联形成亲和吸附剂,就可以对发酵液中的所需蛋白质进行分离纯化。抗原、抗体间亲和力一般比较强,其解离常数为108-1012M,所以洗脱时是比较困难的,通常需要较强烈的洗脱条件。可以采取适当的方法如改变抗原、抗体种类或使用类似物等来降低二者的亲和力,以便于洗脱。
另外金黄色球菌蛋白A(ProteinA)能够与球蛋白G(IgG)结合,可以用于分离各种IgG。

亲和柱介绍
生物分子之间的亲和识别包括抗体和抗原、酶和底物和受体等之间的亲合作用,这些亲和作用属于生物专一性识别;此外,某些物质和生物大分子之间还有一些特异性作用,如染料和某些酶(特别是脱氢酶和激酶等),植物凝集素和糖蛋白,金属离子和蛋白质表面的组氨酸等之间的作用,都可以应用于亲和分离过程。
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