Elisa试剂盒——Elisa实验常见问题及解决方案
重复性不佳,ELISA试剂盒厂家,高CV值
1 样品不均一 加样前充分混匀样品,黄曲霉毒素ELISA试剂盒厂家,取样确保移液位置一致;
2 包被板表面遭到破坏 洗板加样时尽量小心,避免破坏板的包被表面
3 孔与孔之间的交叉污染 孵育后取下盖子小心操作,避免孔与孔的污染;封板膜不能重复使用
4 加样量不一致 样品稀释前应充分混匀,尽可能使用同一移液器并装紧吸嘴
5 边缘效应(外周孔显色较中心孔深) 孵育时尽量100 rpm旋转混匀
6 微量加样不准确 保证微量加样的准确性和均一性
7 不正确的洗涤 洗液准确配制;充分洗涤,静置15秒,兽药残留ELISA试剂盒厂家,确定每一步的洗涤

ELISA试剂盒的试验原理
试剂盒是固相夹心法酶联吸附实验(ELISA).已知浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中的浓度呈比例关系。
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ELISA试剂盒的测定原理
测定技术的基础在于抗原抗体之间的特异结合反应,所以任何的诊断剂离不开好的原料,如抗原抗体,酶等。以前用于测定的抗原通常为各种纯化抗原,而抗体则为纯化抗原动物后获得的多抗体和使用杂交瘤技术得到的抗体,而抗原或抗体的标记物如酶标结合物则通过各种化学合成方法制备。近年来,随着分子生物学的发展,使用基因工程方法制备各种特殊的抗原或抗体及其酶结合物等测定试剂几成为现实的新一代试剂,各种新型使用的测定方法也不断出现。

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