传统小分子特异性antibody制备技术为解决小分子这类半抗原物质无法刺激宿主动物产生antibody的特性，必须将半抗原回复完全抗原的特性。解决这个问题可以通过将小分子和对宿主动物immune原性很强的物质：如OVA、BSA、KLH等偶联，将其制备成完全抗原，通过immune宿主动物，便能促使宿主动物产生针对小分子的特异性antibody，这类antibody通过抗原特异性的筛选便能获取目的antibody。目前，通过此项技术能解决绝大多数小分子特异性antibody的制备，但是也可能由于小分子的结构特异，偶联物和偶联方式的选取、偶联率的差异以及immune技术有待发展等多方面的因素使其特异性antibody的制备存在困难。 棉花等酚类、多糖类物质较多的植物ＤＮＡ提取法：1 取2ｇ新鲜幼嫩的叶片放入研钵中，加入液氮后、充分研磨，待成极细的粉末状时迅速转入到50ｍｌ离心管中。2 在50ｍｌ离心管中加入10ｍｌ冰预冷的提取缓冲液，在涡悬振荡器上充分混匀。3 于4℃，2700×ｇ离心20分钟，倒去上清液。4 在沉淀中加入5ｍｌ裂解缓冲液，在涡旋振荡器上充分混匀。5 于65℃水浴锅中温育30ｍｉｎ。6 加入5ｍｌ氯1仿/异戊1醇(24/1)，并上下翻转以充分混合。7 于4℃，2700×ｇ离心5分钟。8 转移上层水相至一新的50ｍｌ离心管中。9 重复步骤7-9一次。10 加入2/3体积的冰预冷的异丙1醇，并上下翻转以充分混合，至-20℃2ｈ。11 于4℃，1200×ｇ离心10ｍｉｎ。12 在一新管中加入20ｍｌ含80%乙醇15ｍｍｏｌ/ＬＮａＡｃ溶液，用玻棒将ＤＮＡ转入该管(如不能直接用玻棒缠出，可离心后倒出上清，再在其中加入20ｍｌ含80%乙醇15ｍｍｏｌ/ＬＮａＡｃ溶液)，放置20ｍｉｎ后稍许离心，移走上清并吸出残存乙醇，室温干燥。13 加入1 0ｍｌＴＥ(10ｍｍｏｌ/ＬＴｒｉｓ-ＨＣｌＰＨ=8 0，1ｍｍｏｌ/ＬＥＤＴＡ)并加入终浓度为20(ｇ/Ｌ的ＲＮａｓｅＡ，过夜。14 风干，用50μｌＴＥ缓冲液溶解，存于-20℃备用。植物ＤＮＡ的ＳＤＳ提取法：1 取2-3ｇ新鲜叶片，在液氮中研磨成粉状(防止溶化)后转入15ｍｌ离心管中。2 加入5ｍｌ于65℃预热的提取缓冲液，65℃水浴保温30ｍｉｎ(摇动数次)，使提取液与样品充分混合。3 加入2ｍｌ5ｍｏｌ/ＬＫＡｃ，剧烈振荡，冰浴保温20ｍｉｎ以上。4 2700×ｇ离心20ｍｉｎ，将上清液倒入新的15ｍｌ离心管中，(若提取ＤＮＡ用于Ｓｏｕｔｈｅｒｎ等实验，一般在转移上清时加滤膜，防止样品残渣混入，可保证ＤＮＡ纯度)。5 加入4ｍｌ氯1仿/异戊1醇(24∶1)，摇匀，平衡，2700×ｇ离心15ｍｉｎ。6 在另一新的15ｍｌ离心管中加入5ｍｌ预冷的异丙1醇，将上清液用移液枪转入此管，在-20℃冷却30ｍｉｎ以上。7 2700×ｇ离心10ｍｉｎ，弃去上清液，用4ｍｌ70%乙醇洗涤，室温保持10ｍｉｎ。2700×ｇ离心3ｍｉｎ，倒去上清液。8 重复步骤7，用4ｍｌ70%乙醇洗涤，定量DNAmarker，室温保持10ｍｉｎ。2700×ｇ离心3ｍｉｎ，倒去上清液。超净工作台内吹干(3ｈ左右)。9 加1ｍｌＴＥ缓冲液中溶解，加10μｌＲＮａｓｅ(10ｍｇ/ｍｌ)，在37℃恒温箱中温育20ｍｉｎ。10 再加100μｌ3ｍｏｌ/ＬＮａＡｃ和2ｍｌ无水乙醇，2700×ｇ离心3ｍｉｎ，倒去上清液。超净工作台内吹干(3ｈ左右)。11 将ＤＮＡ沉淀溶于150μｌＴＥ中，置于超净工作台内(3ｈ左右)。将ＴＥ溶液转入已灭菌的1 5ｍｌｅｐｐｅｎｄｏｒｆ管中，-20℃保存备用。 定量DNAmarker-友名生物(在线咨询)由武汉友名生物技术有限公司提供。武汉友名生物技术有限公司位于湖北武汉市洪山区野芷湖西路16号创意天地办公04栋701。在市场经济的浪潮中拼博和发展，目前友名生物在其它中享有良好的声誉。友名生物取得商盟认证，标志着我们的服务和管理水平达到了一个新的高度。友名生物全体员工愿与各界有识之士共同发展，共创美好未来。 产品：友名生物供货总量：不限产品价格：议定包装规格：不限物流说明：货运及物流交货说明：按订单
