RNA病毒检测试剂盒用于定性检测和分析RNA病毒和RNA分子,特别适合检测病毒等此类病毒。组分1. ConviFlex? RT-Taq Mix的冻干粉包含:MuLV逆转录酶、Taq聚合酶及dNTP。其中MuLV逆转录酶,来自小鼠白血1病病毒(M-MuLV)并经过基因修饰。这里的Taq聚合酶另兼具热启动功能。此Taq酶在室温下,活性被抗1体所抑制,当温度达到70°C以上时,才会被完全激1活。在70°C 以下时,由于Taq酶没有完全活化,因此实验不会产生非特异性PCR产物和引物二聚体。热启动Taq酶的使用可使PCR具有更高的特异性和灵敏度。 提取DNA常用的方法 一.酚抽提法:先用蛋酶K、SDS破碎细胞,消化蛋白,然后用酚和酚-氯DNA大小为100-150kb 二.甲酰胺解聚法:破碎细胞同上,然后用高浓度甲酰胺解聚蛋白质与DNA的结合,再透析获得DNA可得DNA200kb左右。 三.玻璃棒缠绕法:用盐酸胍裂解细胞,将裂解物铺于乙醇上,然后用带钩或U型玻璃棒在界面轻搅,DNA沉淀液绕于玻棒。生成DNA约80kb。 四.异丙1醇沉淀法:基本同1法,仅用二倍容积异丙1醇替代乙醇,可去除小分子RNA(在异丙1醇中可溶状态) 五.表面活性剂制备法:用Triton X-100A或NP40表面活性剂破碎细胞,然后用蛋白酶K或酚去除蛋白,乙醇沉淀或透析。 六.加热法制备:加热96℃-100℃,五分钟,然后离心后取上清,可用于PCR反应。 七.碱变性制备:先用NaOH作用20分钟,再加HCI中和,离心后取上清,含少量DNA。DNA提取过程中各种试剂的作用及原理溶液II-NaOH-SDS液:NaOH:核酸在pH大于5,小于9的溶液中,是稳定的。但当pH>12或pH<3时,就会引起双链之间氢键的解离而变性。 在溶液II中的NaOH浓度为0.2mo1/L,DNA marker,加抽提液时,该系统的pH就高达12.6, 因而促使染色体DNA与质粒DNA的变性。 SDS: SDS是离子型表面活性剂。它主要功能有: (1)溶解细胞膜上的脂质与蛋白,因而溶解膜蛋白而破坏细胞膜。 (2)解聚细胞中的核蛋白。 (3)SDS能与蛋白质结合成为R-O-SO3-…R+-蛋白质的复合物,使蛋白质变性而沉淀下来。 但是SDS能抑制核糖核酸酶的作用,所以在以后的提取过程中,必须把它去除干净,防止在下一步操作中 (用RNase去除RNA时)受到干扰。 友名生物(多图)-DNA marker由武汉友名生物技术有限公司提供。“商务服务”选择武汉友名生物技术有限公司,公司位于:湖北武汉市洪山区野芷湖西路16号创意天地办公04栋701,多年来,友名生物坚持为客户提供好的服务,联系人:董先生。欢迎广大新老客户来电,来函,亲临指导,洽谈业务。友名生物期待成为您的长期合作伙伴! 产品:友名生物供货总量:不限产品价格:议定包装规格:不限物流说明:货运及物流交货说明:按订单