为什么用无水乙醇沉淀DNA 用无水乙醇沉淀DNA,这是实验中较常用的沉淀DNA的方法。乙醇的优点是可以任意比和水相混溶, 乙醇与核酸不会起任何化学反应,对DNA很安全,因此是理想的沉淀剂。 DNA溶液是DNA以水合状态稳定存在,当加入乙醇时,乙醇会夺去DNA周围的水分子,使DNA失水而易于聚合。一般实验中,是加2倍体积的无水乙醇与DNA相混合,其乙醇的zui终含量占67%左右。 因而也可改用95%乙醇来替代无水乙醇(因为无水乙醇的价格远远比95%乙醇昂贵)。 但是加95%的乙醇使总体积增大,而DNA在溶液中有一定程度的溶解,因而DNA损失也增大, 尤其用多次乙醇沉淀时,就会影响收得率。折中的做法是初次沉淀DNA时可用95%乙醇代替无水乙酵, 后面的沉淀步骤要使用无水乙醇。也可以用0.6倍体积的异丙1醇选择性沉淀DNA。一般在室温下放置15-30分钟即可。 棉花等酚类、多糖类物质较多的植物DNA提取法:1 取2g新鲜幼嫩的叶片放入研钵中,加入液氮后、充分研磨,待成极细的粉末状时迅速转入到50ml离心管中。2 在50ml离心管中加入10ml冰预冷的提取缓冲液,在涡悬振荡器上充分混匀。3 于4℃,2700×g离心20分钟,倒去上清液。4 在沉淀中加入5ml裂解缓冲液,在涡旋振荡器上充分混匀。5 于65℃水浴锅中温育30min。6 加入5ml氯1仿/异戊1醇(24/1),并上下翻转以充分混合。7 于4℃,2700×g离心5分钟。8 转移上层水相至一新的50ml离心管中。9 重复步骤7-9一次。10 加入2/3体积的冰预冷的异丙1醇,并上下翻转以充分混合,至-20℃2h。11 于4℃,1200×g离心10min。12 在一新管中加入20ml含80%乙醇15mmol/LNaAc溶液,用玻棒将DNA转入该管(如不能直接用玻棒缠出,可离心后倒出上清,再在其中加入20ml含80%乙醇15mmol/LNaAc溶液),放置20min后稍许离心,移走上清并吸出残存乙醇,室温干燥。13 加入1 0mlTE(10mmol/LTris-HClPH=8 0,1mmol/LEDTA)并加入终浓度为20(g/L的RNaseA,过夜。14 风干,用50μlTE缓冲液溶解,存于-20℃备用。在整个核酸检测的过程中,zui大的挑战是什么?不是实验室的负压状态,也不是全副武1装的超负荷工作,访问中工作人员不约而同地提到了一个词:准确。新型冠状病毒检测受到患者病程发展以及样本采集等诸多因素的影响,每一个样本都是一道待解的难题,需要排除各种干扰,才能找到准确结果。为了确保检测结果的准确性,只要检测结果存疑,就必须再次复核,还可能要重新检测。医学实验室主要检测的是血液样本。医学实验室收到口岸送样后,登记、编号、录入信息,核酸纯化,血常规检测为自动化操作,每个样本检测时间为1分钟,可实时获得口岸现场被采样入境人员的白细胞和淋巴细胞计数,作为新冠肺1炎的临床表现判断依据之一。卫生检疫综合实验室和医学实验室多种检测方法同时检测,综合判断,确保结果准确性。 核酸纯化-友名生物(推荐商家)由武汉友名生物技术有限公司提供。武汉友名生物技术有限公司为客户提供“商务服务”等业务,公司拥有“友名生物”等,专注于其它等行业。,在湖北武汉市洪山区野芷湖西路16号创意天地办公04栋701的名声不错。欢迎来电垂询,联系人:董先生。 产品:友名生物供货总量:不限产品价格:议定包装规格:不限物流说明:货运及物流交货说明:按订单