ELISA定性测定定性测定的结果判断是对受检标本中是否含有待测抗原或antibody作出'有'或'无'的简单回答，分别用'阳性'、'阴性'表示。'阳性'表示该标本在该测定系统中有反应。'阴性'则为无反应。用定性判断法也可得到半定量结果，即用滴度来表示反应的强度，其实质仍是一个定性试验。在这种半定量测定中，将标本作一系列稀释后进行试验，呈阳性反应的zui高稀释度即为滴度。根据滴度的高低，可以判断标本反应性的强弱，这比观察不稀释标本呈色的深浅判断为强阳性、弱阳性更具定量意义。在间接法和夹心法ELISA中，阳性孔呈色深于阴性孔。在竞争法ELISA中则相反，阴性孔呈色深于阳性孔。 DNA提取过程中各种试剂的作用及原理溶液II-NaOH-SDS液：NaOH：核酸在pH大于5，小于9的溶液中，是稳定的。但当pH>12或pH<3时，就会引起双链之间氢键的解离而变性。 在溶液II中的NaOH浓度为0.2mo1/L，加抽提液时，该系统的pH就高达12.6， 因而促使染色体DNA与质粒DNA的变性。 SDS： SDS是离子型表面活性剂。它主要功能有： (1)溶解细胞膜上的脂质与蛋白，因而溶解膜蛋白而破坏细胞膜。 (2)解聚细胞中的核蛋白。 (3)SDS能与蛋白质结合成为R-O-SO3-…R+-蛋白质的复合物，使蛋白质变性而沉淀下来。 但是SDS能抑制核糖核酸酶的作用，所以在以后的提取过程中，必须把它去除干净，防止在下一步操作中 (用RNase去除RNA时)受到干扰。提取DNA常用的方法 一.酚抽提法：先用蛋酶K、SDS破碎细胞，消化蛋白，然后用酚和酚-氯DNA大小为100-150kb 二.甲酰胺解聚法：破碎细胞同上，然后用高浓度甲酰胺解聚蛋白质与DNA的结合，再透析获得DNA可得DNA200kb左右。 三.玻璃棒缠绕法：用盐酸胍裂解细胞，将裂解物铺于乙醇上，然后用带钩或U型玻璃棒在界面轻搅，DNA沉淀液绕于玻棒。生成DNA约80kb。 四.异丙1醇沉淀法：基本同1法，仅用二倍容积异丙1醇替代乙醇，可去除小分子RNA(在异丙1醇中可溶状态) 五.表面活性剂制备法：用Triton X-100A或NP40表面活性剂破碎细胞，石蜡去除试剂，然后用蛋白酶K或酚去除蛋白，乙醇沉淀或透析。 六.加热法制备：加热96℃-100℃，五分钟，然后离心后取上清，可用于PCR反应。 七.碱变性制备：先用NaOH作用20分钟，再加HCI中和，离心后取上清，含少量DNA。 石蜡去除试剂-友名生物(推荐商家)由武汉友名生物技术有限公司提供。武汉友名生物技术有限公司是湖北 武汉 ,其它的见证者，多年来，公司贯彻执行科学管理、发展、诚实守信的方针，满足客户需求。在友名生物领导携全体员工热情欢迎各界人士垂询洽谈，共创友名生物更加美好的未来。 产品：友名生物供货总量：不限产品价格：议定包装规格：不限物流说明：货运及物流交货说明：按订单
