为什么用无水乙醇沉淀DNA 用无水乙醇沉淀DNA,这是实验中较常用的沉淀DNA的方法。乙醇的优点是可以任意比和水相混溶, 乙醇与核酸不会起任何化学反应,对DNA很安全,因此是理想的沉淀剂。 DNA溶液是DNA以水合状态稳定存在,当加入乙醇时,乙醇会夺去DNA周围的水分子,使DNA失水而易于聚合。一般实验中,是加2倍体积的无水乙醇与DNA相混合,其乙醇的zui终含量占67%左右。 因而也可改用95%乙醇来替代无水乙醇(因为无水乙醇的价格远远比95%乙醇昂贵)。 但是加95%的乙醇使总体积增大,RNA上样Buffer,而DNA在溶液中有一定程度的溶解,因而DNA损失也增大, 尤其用多次乙醇沉淀时,就会影响收得率。折中的做法是初次沉淀DNA时可用95%乙醇代替无水乙酵, 后面的沉淀步骤要使用无水乙醇。也可以用0.6倍体积的异丙1醇选择性沉淀DNA。一般在室温下放置15-30分钟即可。 信使RNA(mRNA)早先发现于1960年,在蛋白质合成过程中负责传递遗传信息、直接指导蛋白质合成,具有以下特点。?1.含量低,占细胞总RNA的1%~5%。2.种类多,可达105种。不同基因表达不同的mRNA。?3.寿命短,不同mRNA指导合成不同的蛋白质,完成使命后即被降解。细菌mRNA的平均半衰期约为1.5分钟。脊椎动物mRNA的半衰期差异极大,平均约为3小时。4.长度差异大哺乳动物mRNA长度为5×102~1×105nt原核生物与真核生物的mRNA虽然在结构上有差异,但功能一样,都是指导蛋白质合成的模板。EXBio的T淋巴细胞增殖反应检测试剂盒(T-cell BlastoFlowEx Kit)#ED7642 旨在测量活化的全血样本中T淋巴细胞的增殖反应。 该试剂盒使用抗CD3和抗Ki67抗1体混合物检测增殖的淋巴细胞。T淋巴细胞增殖反应检测试剂盒实验流程:1.从培养箱中取出试管,取下并丢弃管盖。每管中加入25 ul EDTA溶液,混合。2.在37℃下孵育10分钟。3.加入2ml的PBS,混合。400g离心细胞5分钟,移除上清液。4.轻轻摇动管子扰乱沉淀。加入2ml的稀释固定和裂解溶液,混合。室温下孵育10分钟。5.400g离心细胞5分钟,移除上清液。6.加入0.5ml稀释的破膜溶液,混合。室温下孵育10分钟。7.加入2ml的PBS。400g离心细胞5分钟,移除上清液。8.加入50 ul的CD3/Ki-67 PE抗1体预混液,混匀,室温下孵育至少30分钟。9.加入2ml PBS。400g离心细胞5分钟,移除上清液。10.用0.1-0.3ml的1%甲醛PBS溶液或者稀释的固定和裂解液(1份固定裂解液液+9份PBS的缓冲液)重悬细胞。在2-8℃下暗室条件下储存处理后的样品,直到分析。 RNA上样Buffer-友名生物公司由武汉友名生物技术有限公司提供。武汉友名生物技术有限公司在其它这一领域倾注了诸多的热忱和热情,友名生物一直以客户为中心、为客户创造价值的理念、以、服务来赢得市场,衷心希望能与社会各界合作,共创成功,共创。相关业务欢迎垂询,联系人:董先生。 产品:友名生物供货总量:不限产品价格:议定包装规格:不限物流说明:货运及物流交货说明:按订单