荧光原位杂交(Fluorescence in situ hybridization, FISH)是一种分子细胞遗传学技术,是20世纪80年代末期发展起来的一种非放6射性原位杂交技术。目前这项技术已经广泛应用于动植物基因组结构研究、染色体结构变异分析、病毒感5染分析、人类产前诊断、肿5瘤遗传学和基因组进化研究等许多领域。FISH的基本原理是用荧光标记的单链核酸为探针,与待检材料中未知的单链核酸进行特异性结合,形成可被检测的杂交双链核酸。可用荧光标记的探针直接与染色体进行杂交从而对基因进行染色体定位。 原位杂交试验收集斑马鱼的胚胎,在Holfretor水中培养,到达所需要的发育时期时,用蛋白酶去除卵膜,用4%多聚甲醛固定,在4℃保存,二十四小时后用50%甲6醇2%多聚甲醛溶液洗,然后换成甲9醇,在-20C 保存,待用(两天和两天以上的胚胎需要用双氧6水处理,去除色素。或者使用苯锍脲稀溶液培养,可阻断色素的形成)总的来说,随探针浓度增加,杂交率也增加。另外,在较窄的范围内,随探针浓度增加,敏感性增加。依我们的经验,要获得较满意的敏感性,ISH,膜杂交中32P标记探针与非放0射性标记探针的用量分别为5~10 ng/ml和25~1000ng/ml,而原位杂交中,无论应用何种标记探针,其用量均为0.5~5.0μg/ml。探针的任何内在物理特性均不影响其使用浓度,但受不同类型标记物的固相支持物的非特异结合特性的影响。 ISH-思特进(在线咨询)由武汉思特进科技发展有限公司提供。武汉思特进科技发展有限公司位于湖北省武汉市江夏区高新四路40号葛洲坝。在市场经济的浪潮中拼博和发展,目前思特进在办公、文教项目合作中享有良好的声誉。思特进取得全网商盟认证,标志着我们的服务和管理水平达到了一个新的高度。思特进全体员工愿与各界有识之士共同发展,共创美好未来。 产品:思特进供货总量:不限产品价格:议定包装规格:不限物流说明:货运及物流交货说明:按订单