另一种多聚体促进剂是聚丙0烯0酸,用其钠盐,浓度为2%~4%。与硫酸葡聚糖相比,ISH,其优点是价格低廉,粘度低(MW=90 000)。小分子化学试剂酚和Guandine thiocyanate也能促进杂交,它们可能是通过增加水的疏水性和降低双链和单链DNA间的能量差异而发挥作用。酚作为杂交促进剂,只能在低DNA浓度的液相杂交中观察到,该方法曾被称为酚乳化复性技术,该法不能用于固相杂交,因酚可引起核酸与膜的非特异吸附作用,即使在液相杂交中的应用也是有限的。而Guandine thiocyanate可通过降低双链DNA的Tm值而起作用。此外,该分子还可以促进RNA的杂交,有裂解细胞而抑制RNase的作用。总之,硫酸葡聚糖和聚乙二醇因能用于固相杂交是目前zui常用的杂交促进剂。 多种探针标记检测系统基于地高3辛、生物素和荧光标记分子的标记和检测系统是常见的原位杂交检测方法。荧光标记检测常为直接探针标记方法,如在dUTP/UTP/ddUTP上连接Fluorescein后进行核酸标记。由于标记在核酸上的荧光分子必须经受杂交和洗脱过程中的考验,以及荧光分子易于衰减,其检测灵敏度受到一定的影响。但对荧光分子的直接检测呈现的背景较低。原位杂交;原位杂交(in situ hybridization)将标记的核酸探针与细胞或组织中的核酸进行杂交,称为原位杂交!使用DNA或者RNA探针来检测与其互补的另一条链在细菌或其他真核细胞中的位置。以菌落原位杂交为例:对分散在若干个琼脂平板上的少数菌落(100-200)进行克8隆筛选时,可采用本方法。将这些菌落归并到一个琼脂主平板以及已置于第二个琼脂平板表面的一张硝5酸纤维素滤膜上。经培养一段时间后,对菌落进行原位裂解。主平板应贮存于4℃直至得到筛选结果。 ISH-思特进(推荐商家)由武汉思特进科技发展有限公司提供。“动植物,细菌,细胞生物实验”选择武汉思特进科技发展有限公司,公司位于:湖北省武汉市江夏区高新四路40号葛洲坝,多年来,思特进坚持为客户提供好的服务,联系人:夏经理。欢迎广大新老客户来电,来函,亲临指导,洽谈业务。思特进期待成为您的长期合作伙伴! 产品:思特进供货总量:不限产品价格:议定包装规格:不限物流说明:货运及物流交货说明:按订单