大豆球蛋白 ELISA 试剂盒 （酶联免疫法）说明书
实验原理
本试剂盒采用间接竞争 ELISA 方法，在酶标板微孔条上预包被大豆球蛋 白抗原，样本中的大豆球蛋白和预包被的抗原竞争大豆球蛋白抗体，加入酶 标二抗后，用 TMB 底物显色，样本吸光度值与其所含大豆球蛋白的含量呈 负相关，与标准曲线比较即可得出样本中大豆球蛋白的含量。
样本类型
大豆及其深加工产品（如：豆粕、发酵豆粕、膨化大豆、大豆分离蛋白、 大豆浓缩蛋白等）
技术参数
检测范围：2.8mg/g~179.2mg/g 反应温度：37℃ 反应时间：75min 校准品 1～5 设定浓度分别为： 0mg/mL、2.8mg/mL、11.2mg/mL、44.8mg/mL、179.2mg/mL。 样本在前处理过程中稀释了 7000 倍，校准品实际浓度为设定浓度的 1/7000
试剂盒组成
30×浓缩样本提取液：50mL
3×浓缩样本稀释液：50mL
20×浓缩洗液：50mL
大豆球蛋白检测板：96T
大豆球蛋白校准品（1～5）：各 1mL
大豆球蛋白抗体工作液：7mL
大豆球蛋白酶标试剂：12mL
显色液 A、B：各 7mL
终止液：7mL
盖板膜 2 张、质检报告 1 份、说明书 1 份
所需材料（不提供）
酶标仪（450、630nm 滤光片）、天平（感量 0.01g）、粉碎机、摇床、离 心机、洗板机/洗瓶、单、多道移液器及枪头单道 10～100&61549L、20～200&61549L、 多道 30～300&61549L、量筒、50mL 离心管、2mL 离心管、加样槽、吸水纸、计 时器、蒸馏水
简易操作步骤
1. 提取：称取样本 0.30g 加 30mL1×样本提取工作液，25℃提取 16h
2. 稀释：4000rpm 离心 5min，用 1×样本稀释工作液稀释 70 倍，混匀待检
3. 加样：加入校准品/待测样本 50&61549L，抗体工作液 50&61549L，37℃孵育 30min
4. 洗板：用 1×洗涤工作液洗板 4 次，拍干
5. 加酶：加入酶标试剂 100&61549L/孔，37℃孵育 30min
6. 洗板：用 1×洗涤工作液洗板 4 次，拍干
7. 显色：加入显色液 A、B 的等体积混合液 100&61549L/孔，37℃孵育 15min
8. 终止：加终止液 50&61549L/孔，酶标仪读数
9. 计算：数据带入计算软件
