PHENODRIVE冻干粉末的使用方法:
与传统的培养基质胶相比, 我们的合成基质胶使用过程极为简单, 在室温下即可实现重组使用, 这里就 PHENODRIVE的标准应用流程介绍如下:
由于PHENODRIVE 是以无菌冻干粉末状态进行存储的,胶原凝胶细胞培养, 因此在使用时需要对其进行重组。实验人员可以根据需求,取适量的粉末将其溶解进水、乙醇或培养液中, 这个过程非常简单, 待其溶解后得到无色、透明液体经过滤后即可准备用于培养 , 这一过程即重组。重组后的液体可在-20℃ 的低温下保存3至少3个月。
对于这类耗材表面的涂布应用, 通常建议将PHENODRIVE 冻干粉末溶解进75% 的乙醇中, 按要求的浓度进行重组, 将经过滤的重组溶液浇铸在需要涂布的器皿表面,并在无菌的环境下让其自然蒸发(建议紫外线照射的无菌环境下), 待溶剂蒸发尽后, 即在器皿表面留下一层透明的薄膜,水凝胶细胞培养,即完成涂布的过程。
建议:在无情况下种植细胞,凝胶细胞培养, 待细胞粘附后再添加, 比如在细胞种植3小小时后。
如果采用乙醇溶液进行重组, 应确保所使用的聚合物支架不溶于乙醇 。按照粉末重组步骤, 然后用移液器移取足够的重组溶液将支架完全覆盖, 同样采用自然蒸发的方法在支架的表面及空期间形成一层透明的薄膜。
溶解待培养细胞类型的无组织培养基中的PHENODRIVE, 方法是按照粉末步骤配置适当浓度的重组透明重组溶液,再将从组后的溶液与细胞悬浮液混合, 以达到0.001% ~1%(V/V)的终 PHENODRIVE 浓度。细胞悬浮液的典型细胞浓度是40000个/ml ~1000000个/ml。
现有的细胞培养基质胶的应用中会碰到哪些问题?
1)Matrigel(基质凝胶)很难处理, 只能在低温条件下溶解, 而且,不同批次间的产品在性能上、上会有不同,凝胶,即使来自同一个厂家也不可避免;
2)相对来说,建立的微环境并不十分稳定, 较佳培养时间一般不会超过5天,且售价并不便宜;
3)重组层粘连蛋白和纤连蛋白仅适用于某些类型的细胞, 非常不稳定且昂贵;
4)聚鸟氨酸通常与层粘连蛋白结合使用, 主要限于神经元细胞。
利用PHENODRIVE重组溶液对聚合物3D支架进行涂布:
如果采用乙醇溶液进行重组, 应确保所使用的聚合物支架不溶于乙醇 。按照粉末重组步骤, 然后用移液器移取足够的重组溶液将支架完全覆盖, 同样采用自然蒸发的方法在支架的表面及空期间形成一层透明的薄膜。
注:
1、任何的中性的水介质的溶液都可以用来对PHENODRIVE进行重组, 包括缓冲液;
2、采用乙醇的目的是利用其挥发性来缩短溶剂蒸发的时间;
合成组织培养基质胶(图)-胶原凝胶细胞培养-凝胶由苏州乾芸仪器科技有限公司提供。苏州乾芸仪器科技有限公司实力不俗,信誉可靠,在江苏 苏州 的实验仪器装置等行业积累了大批忠诚的客户。乾芸仪器科技带着精益求精的工作态度和不断的完善理念和您携手步入,共创美好未来!
产品:PhenoDrive合成组织培养基质胶,细胞培养基质胶
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