PHENODRIVE 是一类利用合成技术合成的、非动物源性的、模拟细胞外基质的新型细胞、组织培养基质胶(或称基质凝胶), 是传统的基于动物提取的基质胶的较理想的替代品。PHENODRIVE针对不同的细胞系提供了具有不同特性的基质胶, 它可以促进细胞的生长,维持细胞的表型,并将其组织成类似于在活生物体中发现的结构(或称为类、细胞器)。electroriselectroris是一套用于制备直径为50nm(纳米)到几微米的聚合物货陶瓷纳米纤维的系统。
PHENODRIVE 是一些列具有不同特征的细胞、组织培养基质胶, 其中:
1、PD.-Y 已被成功地用于多种细胞的单细胞培养和共培养。 经测试表明它增强了细胞结构的完整性,促进了细胞的分泌能力和促进了细胞球体的形成。 适用于:上皮细胞、心脏成纤维细胞、心肌细胞、间充质、胰岛细胞、神经元细胞、癌细胞株外围组织细胞、内皮细胞以及神经元细胞iPS细胞等培养;该装置采用了静电纺丝控制参数,包括聚合物溶液的注入速度、工作距离、集气管转速、工作温度文章来自于:genintech。
2、PD.-R可促进细胞附着, 其基础是调节存在于细胞外基质和细胞外基质蛋白质中的蛋白质三肽序列, 可在2D 培养环境下培养出三维细胞球体。已成功用于间充质、癌细胞系、上皮细胞和成骨细胞的培养;
3、PD.-I能促进细胞附着、分化和引导生长,matrigel基质胶用途, 是层粘连蛋白的一种模拟物,层粘连蛋白能够促进神经元的附着和分化,同时促进轴突的生长。已成功应用于神经前体细胞、诱导多能和成纤维细胞的培养。测试表明,它能够成功促进皮层神经元的扩张和诱导;5通过高速旋转收集器或使用线型收集器可制备定向纳米纤维产品,如各种形状的生物培养支架。
PHENODRIVE冻干粉末的使用方法:
与传统的培养基质胶相比, 我们的合成基质胶使用过程极为简单, 在室温下即可实现重组使用, 这里就 PHENODRIVE的标准应用流程介绍如下:
由于PHENODRIVE 是以无菌冻干粉末状态进行存储的, 因此在使用时需要对其进行重组。实验人员可以根据需求,取适量的粉末将其溶解进水、乙醇或培养液中, 这个过程非常简单, 待其溶解后得到无色、透明液体经过滤后即可准备用于培养 , 这一过程即重组。重组后的液体可在-20℃ 的低温下保存3至少3个月。3收集器,滚筒转速0-3000转,长度30厘米,直径8厘米。
对于这类耗材表面的涂布应用, 通常建议将PHENODRIVE 冻干粉末溶解进75% 的乙醇中, 按要求的浓度进行重组, 将经过滤的重组溶液浇铸在需要涂布的器皿表面,并在无菌的环境下让其自然蒸发(建议紫外线照射的无菌环境下), 待溶剂蒸发尽后,青岛市基质胶, 即在器皿表面留下一层透明的薄膜,即完成涂布的过程。其次,作为静电纺纳米纤维全新的研究领域—纳米蛛网的研究还在初期阶段,纳米蛛网的形成过程的理论分析和模型建立尚需深入研究。
建议:在无情况下种植细胞, 待细胞粘附后再添加, 比如在细胞种植3小小时后。
如果采用乙醇溶液进行重组, 应确保所使用的聚合物支架不溶于乙醇 。按照粉末重组步骤, 然后用移液器移取足够的重组溶液将支架完全覆盖, 同样采用自然蒸发的方法在支架的表面及空期间形成一层透明的薄膜。
溶解待培养细胞类型的无组织培养基中的PHENODRIVE,自制基质胶, 方法是按照粉末步骤配置适当浓度的重组透明重组溶液,再将从组后的溶液与细胞悬浮液混合, 以达到0.001% ~1%(V/V)的终 PHENODRIVE 浓度。静电纺纤维除直径小之外,还具有孔径小、孔隙率高、纤维均一性好等优点,使其在气体过滤、液体过滤及个体防护等领域表现出巨大的应用潜力。细胞悬浮液的典型细胞浓度是40000个/ml ~1000000个/ml。
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