总的来说，随探针浓度增加，杂交率也增加。另外，在较窄的范围内，随探针浓度增加，敏感性增加。依我们的经验，要获得较满意的敏感性，膜杂交中32P标记探针与非放0射性标记探针的用量分别为5～10 ng/ml和25～1000ng/ml，而原位杂交中，原位杂交，无论应用何种标记探针，其用量均为0.5～5.0μg/ml。探针的任何内在物理特性均不影响其使用浓度，但受不同类型标记物的固相支持物的非特异结合特性的影响。 根据不同的杂交实验要求，应选择不同的核酸探针。在大多数情况下，可以选择克0隆的DNA或cDNA双链探针。但是在有些情况下，必须选用其它类型的探针如寡核苷酸探针和RNA探针。例如，在检测靶序列上的单个碱基改变时应选用寡核苷酸探针，在检测单链靶序列时应选用与其互补的DNA单链探针（通过克0隆人M13噬菌体DNA获得）或RNA探针，寡核苷酸探针也可。长的双链DNA探针特异性较强，适宜检测复杂的靶核苷酸序列和病原体 ，但不适宜于组织原位杂交，因为它不易透过细胞膜进入胞内或核内。在这种情况下，寡核苷酸探针和短的PCR标记探针（80～150bp）具有较大的优越性。原位杂交技术应用于染色体、细胞和组织切片等样品中进行核酸特异性检测，与免6疫组化技术的结合应用，能将DNA、mRNA和蛋白水平上的基因活性与样品的显微拓扑信息结合起来。1969年Pardue和Gall将放9射性标记的探针直接应用于纯化核酸的杂交，此后得益于分子克6隆技术的发展，及不同探针标记系统和检测系统的应用，大大增加了原位杂交检测的应用灵活性和检测灵敏度。 原位杂交-武汉思特进公司(图)由武汉思特进科技发展有限公司提供。武汉思特进科技发展有限公司为客户提供“动植物，细菌，细胞生物实验”等业务，公司拥有“思特进”等，专注于办公、文教项目合作等行业。，在湖北省武汉市江夏区高新四路40号葛洲坝的名声不错。欢迎来电垂询，联系人：夏经理。 产品：思特进供货总量：不限产品价格：议定包装规格：不限物流说明：货运及物流交货说明：按订单
