杂交瘤细胞的筛选与克0隆细胞融合后,培养于添加了 HAT 的选择培养基的 96 孔板中,培养后半定量换液,培养基更换时应注意轻缓,第 5 天能在显微镜下看到明显的杂交瘤细胞克0隆,第 7 天左右,杂交瘤细胞能长至铺满孔底约 1 /10。此时进行 ELISA 检测养心细胞孔。取细胞培养上清对 MRJ 融合蛋白进行间接 Elisa检测,筛选出能分泌抗0体的杂交瘤细胞孔,有限稀释法对阳性孔进行亚克0隆,经过 3 次亚克0隆后,获得了能够稳定 分 泌 抗 MRJ 融合蛋白单克0隆抗0体的细胞株。对杂交瘤细胞株按从 96 孔板-24 孔板-10 cm 培养皿的顺序扩大培养,部分细胞用于腹0水制备单抗,8周标准兔多抗制备佐剂,部分细胞冻存备用。 DOI:搭建信息资源的桥梁数字对象唯0一标识(digital object identifier,DOI)被形象地称为“英特网上的条形码”,如同贴了标签的商品,数字对象一旦被分配一个DOI号,无论它处于英特网上的任何位置,通过DOI都能够找到它,因此解决了传统网络标识系统的不稳定性,实现了更有效的网络链接。DOI技术即将成为国际上数字出版界构建数字信息交换平台的首要选择。抗原制备及纯化抗原制备: 参照文献[10]制备 MRJ 抗原。复苏pET28a-mrj 转 Rosetta 菌0种 接 种 于 具 Kana 抗 性 的10 mL液体培养基中的,37 ℃ 培养过夜,次日以 1∶ 50转瓶进行扩大培养,当菌液 OD600达 0. 6 时加入浓度为 5 mmol /L 的 IPTG,37 ℃ 诱导 8 h 超声碎裂后进行考马斯亮蓝染色检验,有目的蛋白的大量表达。抗原大量制备及纯化: 以 5 × 10 -4 mol /L 浓度的IPTG,37 ℃ 条件下大量诱导( 200 mL 菌液) 8 h 后收集样品,超声裂解后将所得 MRJ 蛋白过 Ni-IDA 凝胶柱亲和纯化,考马斯亮蓝染色后检测目的蛋白纯度高于 90% ,可用于单克0隆抗0体制备动物免0疫的抗原。 8周标准兔多抗制备佐剂-苏州博特龙(图)由苏州博特龙技术有限公司提供。苏州博特龙技术有限公司在技术合作这一领域倾注了诸多的热忱和热情,博特龙一直以客户为中心、为客户创造价值的理念、以、服务来赢得市场,衷心希望能与社会各界合作,共创成功,共创。相关业务欢迎垂询,联系人:檀总。 产品:博特龙供货总量:不限产品价格:议定包装规格:不限物流说明:货运及物流交货说明:按订单