抗果蝇 MRJ 蛋白单克0隆抗0体的制备和鉴定摘要: 制备抗 果 蝇 MRJ 蛋白单克0隆抗0体可用于研究果蝇 mrj 的 生 物 学 功 能,使 用 IPTG 诱 导 重 组 质 粒pET28a-mrj 在大肠杆0菌 Rosetta 中表达,重组蛋白经过 Ni-IDA 凝胶柱亲和纯化后免0疫 BALB/c 小鼠。然后取免0疫好的小鼠的脾0脏细胞与小鼠骨0髓瘤细胞 SP2 /0 融合,经克0隆和筛选获得了能分泌抗果蝇 MRJ 蛋白单克0隆抗0体的杂交瘤细胞株。腹0水制备后获得单克0隆抗0体,通过 ELISA 和 Western Blot 对所获得的抗0体进行鉴定,结果表明所制备单克0隆抗0体能够特异性结合于原核及真核细胞表达的 MRJ 蛋白,可用于研究 mrj 基因的生物学功能。关键词: mrj; 细胞融合; 单克0隆抗0体 1. 9 腹0水效价的测定1 mg /mL 的 MRJ 原核表达白每孔 100 μL,新型佐剂,包被Elisa 酶标板过夜,以 SP2 /0 细胞培养上清为阴性对照,用间接 Elisa 方法检测腹0水的效价。同时 WesternBlot 检测抗0体使用于 Western Blot 的效价,用 MRJ 重组蛋白做 抗 原 进 行 SDS-PAGE 电 泳,用 制 备 的 MRJ单克0隆 抗0体 作 为 一 抗,设置抗0体稀释浓度 分别为1∶ 500; 1 ∶ 1 000; 1 ∶ 2 000; 1 ∶ 3 000; 1 ∶ 5 000。进 行Western Blot 检测。单抗腹0水制备用佐剂货号规格KX0210048-1010mlKX0210048-500500ml ? ? 将佐剂注射BALB/C小鼠腹腔,每只0.3-0.5ml处理腹腔15天左右(一般12-18天),然后注射杂交瘤细胞,建议每只注射80万-100万个。腹0水会比普通佐剂晚出1.5天-2天,但通常情况下腹0水的量是普通佐剂出量的1.5-2倍,且单抗腹0水效价不变。 新型佐剂-博特龙(推荐商家)由苏州博特龙技术有限公司提供。苏州博特龙技术有限公司在技术合作这一领域倾注了诸多的热忱和热情,博特龙一直以客户为中心、为客户创造价值的理念、以、服务来赢得市场,衷心希望能与社会各界合作,共创成功,共创。相关业务欢迎垂询,联系人:檀总。 产品:博特龙供货总量:不限产品价格:议定包装规格:不限物流说明:货运及物流交货说明:按订单