杂交瘤细胞的筛选与克0隆细胞融合后，培养于添加了 HAT 的选择培养基的 96 孔板中，培养后半定量换液，培养基更换时应注意轻缓，第 5 天能在显微镜下看到明显的杂交瘤细胞克0隆，第 7 天左右，杂交瘤细胞能长至铺满孔底约 1 /10。此时进行 ELISA 检测养心细胞孔。取细胞培养上清对 MRJ 融合蛋白进行间接 Elisa检测，筛选出能分泌抗0体的杂交瘤细胞孔，多抗制备佐剂，有限稀释法对阳性孔进行亚克0隆，经过 3 次亚克0隆后，获得了能够稳定 分 泌 抗 MRJ 融合蛋白单克0隆抗0体的细胞株。对杂交瘤细胞株按从 96 孔板-24 孔板-10 cm 培养皿的顺序扩大培养，部分细胞用于腹0水制备单抗，部分细胞冻存备用。 作用机制：佐剂增强免0疫应答的机制可能有：①改变抗原物理性状，延长抗原在机体内的存在时间和保持对免0疫系统的持续激0活作用，佐剂中的矿物油成分主要起缓释作用，有利于抗原在体内缓慢释放，延缓抗原在体内降解，从而更有效地刺激免0疫系统。②使抗原易被巨噬细胞吞噬，刺激单核巨噬细胞系统，增强其对抗原的处理和呈递抗原的能力。③促进淋巴细胞的增殖、分化，从而扩大和增强机体的免0疫应答的效应。由于改良免0疫法只需二次基础免0疫而常规免0疫法则需要2倍于改良法的免0疫次数，所以改良法抗原用量明显少于常规法，从而大大减少了实验成本的消耗。此外，本实验通过对比两种免0疫方法的细胞融合率及抗0体阳性率，发现改良免0疫法均显著高于常规免0疫法。经过后续实验，证明改良法免0疫小鼠的杂交瘤细胞经二次克0隆化后，抗0体阳性率可达检测孔的90％以上。杂交瘤细胞体外连续传代培养，并冻存复苏后仍具有分泌AFP—McAb的能力，并经染色体计数结果表明已成功获得一株AFP—McAb细胞株。这表明改良法与常规方法具有同样的有效性和稳定性。 多抗制备佐剂-博特龙(在线咨询)由苏州博特龙技术有限公司提供。苏州博特龙技术有限公司为客户提供“二抗,HRP,Biotin,FITC,AU,PE”等业务，公司拥有“博奥龙/Biodragon AbBox”等，专注于生物制品等行业。，在江苏省苏州市相城开发区观塘路1号西交大漕湖科技园C幢810的名声不错。欢迎来电垂询，联系人：刘总。 产品：博特龙供货总量：不限产品价格：议定包装规格：不限物流说明：货运及物流交货说明：按订单
