检测条件概述4.3.1 包被酶标板多种包被条件：抗原或抗0体浓度、pH、离子强度、温度和孵育时间都影响包被效率。 此外，结合蛋白的数量与分子量成反比。试剂盒中包被液为优化的磷酸盐缓冲液，适用于大多数抗原和抗0体的包被。微孔板应选择专0用于 ELISA 的酶标板，不建议使用组织培养板。包被时，抗原或抗0体在包被缓冲液中稀释后加入到酶标板中室温孵育，尽可能使用zui纯的抗原或抗0体。一般来说 1～10μg/ml 室温 1 小时能够包被饱和。为方便，2～8℃过夜可以到满 意的包被效果。 包被后，酶标板用 BSA 稀释/封闭液封闭 45 分钟，稀释/封闭液中含3%BSA，能够通过封闭未反应部位减少非特异性结合并保护包被上的蛋白质活性。如果暂时不继续实验，可以 用塑料膜覆盖酶标板后冷藏保存，需要时再恢复室温继续实验。 当含有的人IgG抗0体的液体通过金标垫时，即与鼠抗人IgG（Fc片段）单克0隆抗0体结合。复合物移动到检测线时，被固定在检测线上的鼠抗人IgG Fc单克0隆抗0体所捕获。随着被0捕获的复合物的堆积，在检测线上呈现出酒红色。当复合物移动到质控线时，羊抗鼠IgG抗0体捕获胶体金标记的鼠单克0隆抗0体。通过判读层析膜上检测线和质控线是否显色，判断样品中是否存在人IgG抗0体。本试纸条检测下限为0.625ug/mL，当检测样品中人IgG抗0体浓度在0.625ug/mL至40μg/mL时，检测线颜色的深浅与样品浓度呈正相关。7.1.1 包被抗原1. 加抗原到酶标板中。2. 室温孵育 1 小时。3. 甩掉板中液体并拍净残液，每孔加入洗涤液 200ul，Hybridoma Feeder添加因子，洗涤 3 次并拍净残液。7.1.2 封闭酶标板1.加 200 uL 1X BSA 稀释/封闭液到每孔中。2. 孵育 30-45 分钟， 甩掉板中液体并拍净残液，每孔加入洗涤液 200ul，洗涤 3 次并拍净残液。7.1.3 与含单克0隆抗0体的培养液反应1.每孔中加 100 uL 含单克0隆抗0体的培养液。2. 室温反应 1 小时.3. 甩掉板中液体并拍净残液。7.1.4 洗板1. 加入 1X 洗涤液。2. 甩掉板中液体并拍净残液。3. 重复 3～5 次。 Hybridoma Feeder添加因子-博特龙(推荐商家)由苏州博特龙技术有限公司提供。苏州博特龙技术有限公司为客户提供“二抗,HRP,Biotin,FITC,AU,PE”等业务，公司拥有“博奥龙/Biodragon AbBox”等，专注于生物制品等行业。，在江苏省苏州市相城开发区观塘路1号西交大漕湖科技园C幢810的名声不错。欢迎来电垂询，联系人：刘总。 产品：博特龙供货总量：不限产品价格：议定包装规格：不限物流说明：货运及物流交货说明：按订单
