细胞融合取已免0疫小鼠的脾0脏用不完全培养基制成细胞悬液,计数。收集选择生长状态良好的 SP2 /0 骨0髓瘤细胞,制成细胞悬液,计数。将 SP2 /0 骨0髓瘤细胞与免0疫小鼠的脾细胞以 1∶ 10 在 50% 的 PEG1500 作用下融合[8]。加 HAT 选择培养基重悬混匀后滴入到铺有饲养层细胞的 3 块 96 孔细胞培养板。放入37 ℃ ,lipo2000,含 5% 的 CO2 培养箱中培养。 通过后腿小腿肌肉注射免0疫小鼠(视频),每只小鼠注射100μl。备注:本佐剂与抗原混合后产生沉淀属正常现象,抽入针管前应充分混匀,抽入针管后应尽快注射。第21天按同样方式加强免0疫1针。备注:每次佐剂和抗原现配现用。第35天采微量尾血进行ELISA测定,抗0体滴度应在1:10000-1:10000000范围内,随后即可采全血或按常规方法进行抗原冲击免0疫和脾细胞融合。结 果一、两种免0疫方式小鼠血0清效价比较对两组试验动物在完成了基础免0疫后,尾静脉采集少量血液,分离血0清,进行间接ELISA测定抗0体效价,检测结果见图1。由图中数据可知,新的改良免0疫方法,在第二次免0疫后,抗0体效价即达到1:104。两组数据经生物学统计软件SPSS(Windows 13.0版)进行t检验,统计结果差异极显著(P(0.001)。二、两种免0疫方式小鼠融合率比较在细胞融合后约7~10 d可见孔内杂交瘤细胞生长,当细胞融合成片达孔底面积的35%~50%时,用ELISA检测特异性抗0体。两组免0疫小鼠细胞著。改良法耗费时间短,但获得的抗0体效价更高。 lipo2000-博特龙技术有限公司由苏州博特龙技术有限公司提供。苏州博特龙技术有限公司是江苏 苏州 ,生物制品的见证者,多年来,公司贯彻执行科学管理、发展、诚实守信的方针,满足客户需求。在博特龙领导携全体员工热情欢迎各界人士垂询洽谈,共创博特龙更加美好的未来。 产品:博特龙供货总量:不限产品价格:议定包装规格:不限物流说明:货运及物流交货说明:按订单