综上所述，新的改良的小鼠免0疫方法具有很好实验效果。孕妇血0清AFP水平的变化与唐氏综合征有密切关系。目前孕中期人绒毛膜促性腺激0素(HCG)联合AFP筛查唐氏综合征胎儿已成为欧美亚许多常规服务项目之一，在假阳性率为5％左右情况下，这种筛查方案对唐氏综合征的检出率可以达65％～75％[9-11|。因而免0疫方法测定血0清中AFP浓度已在临床得到广泛应用。羊水和母体血0清中AFP浓度的升高，对胎儿神经管缺陷和其他遗传缺陷的产前诊断，也具有应用价值。在大多数原发性肝细胞癌和内胚窦癌患者血0清中AFP浓度升高，检测AFP有助于肿0瘤的早期诊断，也是在治0疗过程中观察疗0效的一项指标。采用本实验新改进的方法制备AFP—McAb，对胚胎发育、癌变过程中基因表达、AFP的纯化、肝0癌的导向治0疗以及提供诊断0试剂等都有重要的实际应用意义。 动物免0疫使用 quickantibody 作为免0疫佐剂，对小鼠腿部肌肉注射免0疫，pei转染试剂，MRJ 重组蛋白( 1 μg /mL) 与免0疫佐剂各200 μL 混匀免0疫 6-8 周龄 BALB / c 小鼠 4 只，每只注射 100 μL。初次免0疫后第 21 天同样的方法进行第二次免0疫，第 35 天尾静脉取少量血做效价检测，间接 ELISA 检测效价滴度高于 1 ∶ 8 000 则进行冲击免0疫，冲击免0疫直接以不加佐剂的 MRJ 蛋白对小鼠冲击免0疫一次，每只 20 μg。冲击免0疫后 96 h 内取脾0脏细胞做细胞融合。试剂与仪器试 剂: pET28a-mrj 转 Rosetta 菌 0种 由 本 实 验 室 所保存。免0疫佐剂 quickantibody 购自北京康碧泉公司;HAT 选择性培养基、HT 培养基、8-Azaguanine 和融合试剂 50% PEG 购自美国 Sigma 公司; 胎牛血0清及 PRMI 1640 培 养 基 为 Hyclone 产 品; 辣 根 过 氧 化 物 酶( HRP) 标记山羊抗小鼠 IgG ; 8 周龄雌性健康 BALB / c 小鼠，本实验室饲养; 小鼠骨0髓瘤细胞 SP2 /0 由南京大学赠送，融合前两星期复苏并经 8-Azaguanine筛选; 其他试剂均为国产分析分析纯。仪器: 二 氧 化 碳 培 养 箱( Thermo) ; 倒 置 显 微 镜( Olympus) ; 细胞培养耗材，96 孔板、24 孔板、6 孔细胞培养板、移液qiang( Corning) ; 1 mL 的 A 蛋白层析柱 pei转染试剂-博特龙技术有限公司由苏州博特龙技术有限公司提供。苏州博特龙技术有限公司是从事“二抗,HRP,Biotin,FITC,AU,PE”的企业，公司秉承“诚信经营，用心服务”的理念，为您提供更好的产品和服务。欢迎来电咨询！联系人：刘总。 产品：博特龙供货总量：不限产品价格：议定包装规格：不限物流说明：货运及物流交货说明：按订单
