材料与方法一、材料AFP购自上海领潮公司。SP2/0骨0髓瘤细胞(中科院上海细胞库)。8~12周龄Balb/c小鼠(第四军0医大学实验动物中心)。SPF级。二、方法1.动物免0疫:将4只8~12周龄Balb/c小鼠随机分为两组,每组2只,分别命名为1号和2号(第yi组)、3号和4号(第二组)。第yi组按常规免0疫方法进行免0疫一…,铝佐剂,第二组采用改良的免0疫方法进行免0疫。免0疫前静脉采集少量血液,析出血0清作为后续检测的阴性对照血0清。第yi组:AFP50ug(50肚1)与等量福氏完全佐剂(Sigma,美国)混合,充分乳化后注入8~12周龄Balb/c小鼠腹腔,2周后用同量抗原加不完全福氏佐剂(Sigma,美国)腹腔注射,4周后用同量抗原加不完全福氏佐剂腹腔注射,融合前3 d作腹腔注射加强免0疫。 结 果一、两种免0疫方式小鼠血0清效价比较对两组试验动物在完成了基础免0疫后,尾静脉采集少量血液,分离血0清,进行间接ELISA测定抗0体效价,检测结果见图1。由图中数据可知,新的改良免0疫方法,在第二次免0疫后,抗0体效价即达到1:104。两组数据经生物学统计软件SPSS(Windows 13.0版)进行t检验,统计结果差异极显著(P(0.001)。二、两种免0疫方式小鼠融合率比较在细胞融合后约7~10 d可见孔内杂交瘤细胞生长,当细胞融合成片达孔底面积的35%~50%时,用ELISA检测特异性抗0体。两组免0疫小鼠细胞著。改良法耗费时间短,但获得的抗0体效价更高。单抗腹0水制备用佐剂货号规格KX0210048-1010mlKX0210048-500500ml ? ? 将佐剂注射BALB/C小鼠腹腔,每只0.3-0.5ml处理腹腔15天左右(一般12-18天),然后注射杂交瘤细胞,建议每只注射80万-100万个。腹0水会比普通佐剂晚出1.5天-2天,但通常情况下腹0水的量是普通佐剂出量的1.5-2倍,且单抗腹0水效价不变。 铝佐剂-博特龙(在线咨询)由苏州博特龙技术有限公司提供。行路致远,砥砺前行。苏州博特龙技术有限公司致力成为与您共赢、共生、共同前行的战略伙伴,更矢志成为生物制品具有竞争力的企业,与您一起飞跃,共同成功! 产品:博特龙供货总量:不限产品价格:议定包装规格:不限物流说明:货运及物流交货说明:按订单