通过后腿小腿肌肉注射免0疫小鼠(视频),每只小鼠注射100μl。备注:本佐剂与抗原混合后产生沉淀属正常现象,抽入针管前应充分混匀,抽入针管后应尽快注射。第21天按同样方式加强免0疫1针。备注:每次佐剂和抗原现配现用。第35天采微量尾血进行ELISA测定,抗0体滴度应在1:10000-1:10000000范围内,随后即可采全血或按常规方法进行抗原冲击免0疫和脾细胞融合。 【摘要】 目的建立一种制备甲胎蛋白单克0隆抗0体(AFP—McAb)杂交瘤细胞系的方法。 方法 以常规和改良两种方式同时免0疫8~12周Balb/c小鼠,取小鼠脾细胞与骨0髓瘤细胞SP2/0融合并行次黄piao呤、氨基蝶呤与胸苷选择性培养。用间接酶链免0疫吸附试验法(EI。ISA)筛选阳性克0隆株,并建立细胞系。 结果 在较短时间内,改良法能获得高0效价的免0疫抗0体,与常规免0疫法相比有极显著差异(P<0.001),同时改良法的细胞融合率和抗0体阳性率也显著高于常规免0疫法(P常规的McAb制备中动物免0疫程序,并能成功筛选出AFP—McAb杂交瘤细胞系。1. ?第21天按同样方式加强免0疫1针。备注:每次佐剂和抗原现配现用。2. ?第35天采微量血进行ELISA测定,抗0体滴度应在1:10000-1:10000000范围内,随后即可采全血或按常规方法进行抗原冲击免0疫和脾细胞融合。3. ?若抗0体滴度没有达到要求,可在第42天按同样方式加强免0疫1针。备注:通常情况下小鼠只需免0疫2针,CPG佐剂,而家兔往往需要免0疫3针。4. ?若免0疫3针,可在第52-56天采微量血进行ELISA测定,抗0体滴度应在1:10000-1:1000000范围内,随后即可采全血或按常规方法进行抗原冲击免0疫和脾细胞融合。备注:佐剂免0疫效果有时也与抗原特性有关,若免0疫3针后仍达不到要求,不建议进行更多针次免0疫。 CPG佐剂-苏州博特龙公司(在线咨询)由苏州博特龙技术有限公司提供。“二抗,HRP,Biotin,FITC,AU,PE”选择苏州博特龙技术有限公司,公司位于:江苏省苏州市相城开发区观塘路1号西交大漕湖科技园C幢810,多年来,博特龙坚持为客户提供好的服务,联系人:刘总。欢迎广大新老客户来电,来函,亲临指导,洽谈业务。博特龙期待成为您的长期合作伙伴! 产品:博特龙供货总量:不限产品价格:议定包装规格:不限物流说明:货运及物流交货说明:按订单