甲胎蛋白(AFP)是一种胎儿特异性糖蛋白,分子量约70,000~72,000道尔顿^,在胚胎肝0脏和卵黄囊中合成,正常人血中含量甚微。1972年有人首0次报道开放性神0经管畸形胎儿、羊水中有高水平的AFP。若胎儿羊水中AFI’值高于均值常见于患无脑儿或脊柱裂的胎儿,亦见于其他多种畸形,如先0天性shen病、食道或肠闭锁、囊0性水瘤、骶尾部畸胎瘤、Rh血型不和、先天愚型、先0天性性腺发育不全等。1983年发现母体血0清AFP水平的降低与唐氏综合征有密切关系一。因此制备高0效特异的AFP单克0隆抗0体(McAb)具有重要的意义。 【摘要】 目的建立一种制备甲胎蛋白单克0隆抗0体(AFP—McAb)杂交瘤细胞系的方法。 方法 以常规和改良两种方式同时免0疫8~12周Balb/c小鼠,取小鼠脾细胞与骨0髓瘤细胞SP2/0融合并行次黄piao呤、氨基蝶呤与胸苷选择性培养。用间接酶链免0疫吸附试验法(EI。ISA)筛选阳性克0隆株,并建立细胞系。 结果 在较短时间内,改良法能获得高0效价的免0疫抗0体,与常规免0疫法相比有极显著差异(P<0.001),同时改良法的细胞融合率和抗0体阳性率也显著高于常规免0疫法(P常规的McAb制备中动物免0疫程序,细胞转染试剂,并能成功筛选出AFP—McAb杂交瘤细胞系。原理新型乳剂是一种具有自主知识产权、独0特配方的新型油包水佐剂,用于免0疫小鼠和家兔等实验动物以制备单、多克0隆抗0体。该佐剂以弗氏不完全佐剂为基础,添加了多种具有强免0疫刺激0活性的TLR配体。新型佐剂与常规使用的弗氏佐剂相比,具有以下优点:(1)新型乳剂活性强于弗氏不完全佐剂;(2)与弗氏完全佐剂不同,不含有干扰免0疫应答的无关蛋白成分;(3)安全性好,副反应率低;(4)免0疫针次少、抗原用量低等多方面优点。 细胞转染试剂-博特龙技术有限公司由苏州博特龙技术有限公司提供。“二抗,HRP,Biotin,FITC,AU,PE”选择苏州博特龙技术有限公司,公司位于:江苏省苏州市相城开发区观塘路1号西交大漕湖科技园C幢810,多年来,博特龙坚持为客户提供好的服务,联系人:刘总。欢迎广大新老客户来电,来函,亲临指导,洽谈业务。博特龙期待成为您的长期合作伙伴! 产品:博特龙供货总量:不限产品价格:议定包装规格:不限物流说明:货运及物流交货说明:按订单