在McAb的研制过程中,动物免0疫是McAb制备过程中的关键步骤。但是传统动物免0疫方式通常需要二个月左右,不但耗时长,而且抗原消耗的量大、对抗原纯度要求高。本实验试图通过优化传统免0疫小鼠的方法,大大缩短动物免0疫时间并减少了抗原的消耗量,为进一步组装患者肿0瘤组织及血0清中AFP水平检测的试剂盒打下良好的基础,为临床研究、肿0瘤的诊治提供更为有效的工具。 由于改良免0疫法只需二次基础免0疫而常规免0疫法则需要2倍于改良法的免0疫次数,所以改良法抗原用量明显少于常规法,从而大大减少了实验成本的消耗。此外,本实验通过对比两种免0疫方法的细胞融合率及抗0体阳性率,发现改良免0疫法均显著高于常规免0疫法。经过后续实验,证明改良法免0疫小鼠的杂交瘤细胞经二次克0隆化后,抗0体阳性率可达检测孔的90%以上。杂交瘤细胞体外连续传代培养,并冻存复苏后仍具有分泌AFP—McAb的能力,并经染色体计数结果表明已成功获得一株AFP—McAb细胞株。这表明改良法与常规方法具有同样的有效性和稳定性。1. ?第21天按同样方式加强免0疫1针。备注:每次佐剂和抗原现配现用。2. ?第35天采微量血进行ELISA测定,抗0体滴度应在1:10000-1:10000000范围内,随后即可采全血或按常规方法进行抗原冲击免0疫和脾细胞融合。3. ?若抗0体滴度没有达到要求,脂质体转染试剂,可在第42天按同样方式加强免0疫1针。备注:通常情况下小鼠只需免0疫2针,而家兔往往需要免0疫3针。4. ?若免0疫3针,可在第52-56天采微量血进行ELISA测定,抗0体滴度应在1:10000-1:1000000范围内,随后即可采全血或按常规方法进行抗原冲击免0疫和脾细胞融合。备注:佐剂免0疫效果有时也与抗原特性有关,若免0疫3针后仍达不到要求,不建议进行更多针次免0疫。 博特龙(多图)-脂质体转染试剂由苏州博特龙技术有限公司提供。“二抗,HRP,Biotin,FITC,AU,PE”选择苏州博特龙技术有限公司,公司位于:江苏省苏州市相城开发区观塘路1号西交大漕湖科技园C幢810,多年来,博特龙坚持为客户提供好的服务,联系人:刘总。欢迎广大新老客户来电,来函,亲临指导,洽谈业务。博特龙期待成为您的长期合作伙伴! 产品:博特龙供货总量:不限产品价格:议定包装规格:不限物流说明:货运及物流交货说明:按订单