ELISA试剂盒的测试要求
做好对照
正式试验时，应分别以阳性对照与阴性对照控制试验条件，待检样品应作一式二份，以保证实验结果的准确性。有时本底较高，说明有非特异性反应。
实验条件的选择
在ELISA中，进行各项实验条件的选择是很重要的，其中包括:
（1）固相载体的选择：许多物质可作为固相载体，如聚乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。常用的是40孔聚乙烯凹孔板。不管何种载体，在使用前均可进行筛选：用等量抗原包被，兽药残留ELISA试剂盒哪家好，在同一实验条件下进行反应，观察其显色反应是否均一性，据此判明其吸附性能是否良好。
（2）包被（或抗原）的选择：将（或抗原）吸附在固相载体表面时，要求纯度要好，吸附时一般要求PH在9.0～9.6之间。吸附温度，兽药残留ELISA试剂盒厂家，时间及其蛋白量也有一定影响，一般多采用4℃ 18～24小时。蛋白质包被的适浓度需进行滴定：即用不同的蛋白质浓度（0.1、1.0和10μg/ml等）进行包被后，浙江兽药残留ELISA试剂盒，在其它试验条件相同时，观察阳性标本的OD值。选择OD值大而蛋白量少的浓度。对于多数蛋白质来说通常为1～10μg/ml。
（3）酶标记工作浓度的选择：首先用直接ELISA法进行初步效价的滴定（见酶标记部份）。然后再固定其它条件或采取“方阵法”（包被物、待检样品的参考品及酶标记分别为不同的稀释度）在正式实验系统里准确地滴定其工作浓度。
（4）酶的底物及供氢体的选择：对供氢体的选择要求是价廉、安全、有明显地显色反应，而本身无色。有些供氢体（如OPD等）有潜在的致癌作用，应注意防护。有条件者应使用不致癌、灵敏度高的供氢体，如TMB和ABTS是较为满意的供氢体。底物作用一段时间后，兽药残留ELISA试剂盒公司，应加入强酸或强碱以终止反应。通常底物作用时间，以10-30分钟为宜。底物使用液必须新鲜配制，尤其是H2O2在临用前加入。
ELISA试剂盒的操作方法——间接法
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1.用包被缓冲液将已知抗原稀释至1～10μg/ml，每孔加0.1ml，4℃过夜；
2.次日洗涤3次；
3.加一定稀释的待检样品（未知）0.1ml于上述已包被之反应孔中，置37℃孵育1小时，洗涤；
4.（同时做空白、阴性及阳性孔对照）于反应孔中，加入新鲜稀释的酶标第二（抗）0.1ml；
5.37℃孵育35-60分钟，洗涤；
6.然后用DDW洗涤。
其余步骤同“双夹心法”的4、5、6。
Elisa试剂盒实验原理
将目标包被于微孔板中，制成固相载体，向微孔中分别加入标准品或标本，其中的目标连接于固相载体上的结合，然后加入微生物化的目标，将未结合的生物素洗净后，加入HRP标记和亲和素，再次洗涤后加入TMB底物显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的目标呈正相关。在450nm波长下测定吸光度（O.D.值），计算样品浓度。
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