ELISA试剂盒的用途
ELISA的基础是抗原或的固相化及抗原或的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或仍保持其活性,酶标记的抗原或既保留其活性,又保留酶的活性。在测定时,受检标本(测定其中的或抗原)与固相载体表面的抗原或起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原复合物与液体中的其他物质分开。再加入酶标记的抗原或,也通过反应而结合在固相载体上。此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,间接地放大了反应的结果,使测定方法达到很高的敏感度。 ELISA可用于测定抗原,玉米赤霉烯酮ELISA试剂盒价格,也可用于测定。
然而,影响Elisa试验结果的因素很多,故加强各个环节的才能充分发挥其方法学的优点。

Elisa试剂盒——Elisa实验常见问题及解决方案
重复性不佳,高CV值
1 样品不均一 加样前充分混匀样品,玉米赤霉烯酮ELISA试剂盒,取样确保移液位置一致;
2 包被板表面遭到破坏 洗板加样时尽量小心,避免破坏板的包被表面
3 孔与孔之间的交叉污染 孵育后取下盖子小心操作,避免孔与孔的污染;封板膜不能重复使用
4 加样量不一致 样品稀释前应充分混匀,尽可能使用同一移液器并装紧吸嘴
5 边缘效应(外周孔显色较中心孔深) 孵育时尽量100 rpm旋转混匀
6 微量加样不准确 保证微量加样的准确性和均一性
7 不正确的洗涤 洗液准确配制;充分洗涤,静置15秒,确定每一步的洗涤

Elisa试剂盒——Elisa实验常见问题及解决方案
显色淡,玉米赤霉烯酮ELISA试剂盒公司,灵敏度偏低
1 试剂盒未充分平衡 试剂盒从2~8℃冰箱取出后打开盒盖,于室温平衡至少20分钟,确保所有试剂已平衡至室温(约25℃)
2 样品不适合做ELISA检测 样品一般选择培养上清、血浆。其他样品形式可能不适合做ELISA检测或者需要优化检测的条件(例如稀释液的成分)
3 酶标板在贮存或洗后拍干时过分干燥 防止板过于干燥
4 包被遭到破坏 操作温和,移液不能碰到孔底
5 样本和孵育条件不合适 按照说明书条件,玉米赤霉烯酮ELISA试剂盒哪家好,建议孵育过程中全程振荡孵育。
6 洗涤浸泡时间过长 按照说明书操作。勿人为增加浸泡时间;
7 偶联HRP试剂污染 弃去试剂,重新配置
8 错误的稀释偶联HRP试剂 弃去试剂,重新配置
9 TMB底物孵育时间过短,因非人为因素影响,需要优化孵育时间 确定合适的孵育时间:人为判定-高浓度的标准品出现深蓝色;S4-5有淡蓝色;机器判定620 nm波长下测定OD值达到0.6-0.65
10 样本浓度过高或存在基质效应 建议做不同稀释倍数,确认样本稀释倍数。
11 滤光片设置有问题或者波长选择不对 确认仪器设置及选择正确的波长检测。
12 酶标板不适合做ELISA 不能使用细胞培养板,建议使用ELISA高吸附力板子。

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