微生物限度检测方法主要包括3种。
1.微生物计数法:该种检测方法用于能在有氧条件下生长的嗜温细菌和真菌的计数。本法用于检查非无菌制剂及其原、辅料等是否符合相应的微生物限度标准。检验项目分别为:需氧菌、霉菌及酵母菌计数。其中,需氧菌计数方法适用性试验:铜绿假单胞菌、金黄色、枯草芽孢。霉菌及酵母菌计数方法适用性试验:白色、黑曲霉。
2.控制菌检查法:控制菌检查法系用于在规定的试验条件下,检査供试品中是否存在特定的微生物。分别为培养基适用性检查和控菌检查方法适用性试验。控制菌计数方法适用性试验:耐胆盐革兰阴性菌、大肠埃希氏菌、沙门氏菌、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄菌、梭菌、白色。
3.方法学适用性试验:药品的微生物计数方法应进行方法适用性试验,以确认所采用的方法适合于该产品的微生物计数。
{微生物检测}常规鉴定技术
微生物保存
基本原理是在挑选优良纯培养物并使其处于休眠状态基础上,微生物限度试验周期,人为地创造一个有利于休眠的环境,使其长期保存后仍能保持zhong原有的优良特性。基本措施是低温、真空、干燥。
保藏方法:
1、定期移植法
亦称传代培养保藏法,人手微生物限度试验周期,指将junzhong接种于适宜的斜面培养基上,细菌微生物限度试验周期,适条件下培养,完成培养于4~6℃进行保存并间隔一定时间(3-6个月)进行移植培养的一种短期种保藏方法。
2、液体石蜡法
指将junzhong接种在适宜的斜面培养基上,适条件下培养好后注入灭的液体石蜡,使其覆盖整个斜面,再直立放置于低温(4~6℃)干燥处进行保存的一种保藏方法。
3、真空冷冻干燥法
指将保藏的junzhong细胞或孢子悬浮于保护剂中,经预冻后在真空条件下使水分升华,再经真空封存后保存的一种长期保存方法。
4、-80℃低温法
将junzhong悬浮于保护剂中,在-80℃冰箱中保存的一种长期保藏方法

2.薄膜过滤法
除另有规定外,病原微生物限度试验周期,按计数方法适用性试验确认的方法进行供试液制备。取相当于1g、1ml或10c㎡供试品的供试液,若供试品所含的菌数较多时,可取适宜稀释级的供试液,照方法适用性试验确认的方法加至适量稀释液中,立即过滤,冲洗,冲洗后取出滤膜,菌面朝上贴于胰酪大豆胨琼脂培养基或沙氏葡萄糖琼脂培养基上培养。
培养和计数 培养条件和计数方法同平皿法,每张滤膜上的菌落数应不超100cfu。
菌数报告规则 以相当于1g、1ml或10c㎡供试品的菌落数报告菌数;若滤膜上无菌落生长,以<1报告菌数(每张滤膜过滤1g、1ml或10c㎡供试品),或<1乘以zui低稀释倍数的值报告菌数。
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