待动物脑缺血再灌注模型su醒后,给予足够的食物和水分,每天检查动物的体重、精神和活动等情况根据实验计划,在规定的时间点对动物进行行为学评价、神经功能评价、脑组织取样、脑血流测量、生化指标检测、分子生物学检测等方法,以评估脑缺血再灌注损伤的程度和机制。脑缺血再灌注模型是一种复杂的病理过程,涉及多种因素和途径。目前认为,脑缺血再灌注损伤主要包括能量代谢障碍、细胞凋亡、yan症反应、氧化应激、谷氨酸激fa性毒性、钙超载、自噬等方面。
神经功能评价和行为学评价主要用于反映脑缺血再灌注模型动物的神经行为表现和损伤程度,常用的方法有Longa评分法、Bederson评分法、Zealander梯形迷宫法、Morris水迷宫法等。脑血流测量主要用于监测动物的脑血流变化和再灌注效果,常用的方法有激光多普勒血流仪、核ci共振灌注成像等。脑组织染色主要用于观察动物的脑组织结构和病理变化,常用的方法有TTC染色、HE染色、Nissl染色等。生化指标检测主要用于测定动物的血液或脑组织中的一些相关物质的含量和活性,如乳酸脱氢酶、超氧化物歧化酶、丙二醛等 。分子生物学检测主要用于分析动物的基因表达和蛋白质水平的变化,如RT-PCR、Western blot、免yi组化等。

5.MCAO操作中的注意事项 首先,在实验中需注意麻zui药wu的浓度和剂量,保持气道通畅。避免刺激气管,防止因分泌物过多而引起窒息si亡。其次,分离颈总动脉、颈内动脉和颈外动脉时一定要注意勿损伤迷走神经,并将血管周围的结缔组织剥离干净,为线栓插入做好准备。
同时注意勿伤及血管以防止大出血所致的si亡。CCA上剪口是手术关键步骤之一,眼ke剪要锐利,脑缺血再灌注模型建立,剪口时剪刀与血管正上方约成60°角,剪口不宜太大,否则血管容易断裂造成实验失败。以不超过CCA壁上1/4为宜,但也不宜太小,否则入线困难。
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