双分子荧光互补（Bimolecular Fluorescence Complementation，BiFC）是一种用于研究蛋白质-蛋白质相互作用的强大技术。它利用荧光蛋白的特性，将两个不同的荧光蛋白片段（通常是黄色荧光蛋白和绿色荧光蛋白）分别与两个不同的蛋白质结合，以检测它们之间的相互作用。
BiFC的原理是基于荧光蛋白的特性，这些荧光蛋白可以发射出特定的光子，从而在细胞中产生荧光信号。当两个不同的荧光蛋白片段结合在一起时，它们会形成一个完整的荧光蛋白，并发出更强的荧光信号。因此，通过观察荧光信号的强度和分布，我们可以推断出两个蛋白质是否相互作用以及相互作用的确切位置。
为什么不先对基因做预测，在预测的结果上直接做共定位？
不同的预测网站有不同的计算方法，同一个基因在不同的预测网站也可能得出不同的定位结果。另外所有的结果都应是基于实验得到的，对于不清楚可能定位在哪里的基因，一般推荐先做普通定位，根据普通定位的结果再决定做哪种细胞器的共定位。
适用于什么实验场景？
（1）基因功能研究，文章里总少不了这一项。
（2）研究蛋白相互作用，与酵母双杂实验结果相互验证。
启动子筛选：寻找基因表达的关键调控元件
基因表达的调控是一个复杂的过程，其中关键的环节之一就是转录的启动子。转录是生物体内基因表达的重要步骤，而转录的启动子则是这一过程的关键调控元件。因此，启动子的筛选对于理解基因表达的调控机制以及疾病的等方面都具有重要的意义。
启动子的筛选通常是通过生物信息学的方法进行的。首先，双分子荧光互补，通过基因组测序和生物信息学分析，可以确定基因的启动子区域，这一区域通常位于基因编码区的上游。然后，通过各种预测算法，可以分析启动子区域内的DNA序列，以确定是否存在转录因子的结合位点。这些转录因子通常是蛋白质，它们可以与DNA序列结合，从而影响转录的效率和程度。
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