支原体污染细胞污染可分为细菌、霉菌、酵母菌、支原体污染,其中支原体污染发生的概率>50%。支原体(Mycoplasma) 是小的原核生物,约0.1-0.3μm,可穿透0.22-0.45 μm 过滤膜 (BI经过3次0.1μm滤膜并且检测支原体)。支原体污染棘手的原因之一是没有如其他污染源“立即可辨”的现象,支原体污染侵袭细胞但是并不一定致死。如果您的细胞出现如下状态
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支原体污染细胞污染可分为细菌、霉菌、酵母菌、支原体污染,其中支原体污染发生的概率>50%。支原体(Mycoplasma) 是小的原核生物,约0.1-0.3μm,可穿透0.22-0.45 μm 过滤膜 (BI经过3次0.1μm滤膜并且检测支原体)。支原体污染棘手的原因之一是没有如其他污染源“立即可辨”的现象,支原体污染侵袭细胞但是并不一定致死。如果您的细胞出现如下状态:增殖变慢、形态变差、培养液变黄但是没有浑浊,说明您的细胞可能正遭受支原体的摧残!
支原体染预防,俗话说,预防胜于治,所以操作的器材与环境消毒也至关重要:1.超净工作台预防,BI也提供Pharmacidal (货号: IC-110100)作为相应的处理试剂,Pharmacidal可有效预防真菌(和孢子),细菌(和孢子),支原体和病毒 (包括HIV和Hepatitis B) 的生长和污染。Pharmacidal不需稀释,每次使用超净工作台前或每天喷洒一次台面,二氧化碳培养箱每两周一次喷洒消毒,喷洒后让其自然风干,无需擦拭。
细胞培养时可能导致衰老的原因:1.细胞传代次数比较多,一定要控制细胞传代次数!大量扩增细胞,将细胞进行冻存,在必要的时候重新复苏。2.胰酶消化时间太长,胰酶消化时间过长容易导致细胞状态不佳以及胞质疏松;细胞传代时需要留意胰酶消化的时间。消化过度,在消化细胞时会对细胞的表面蛋白有较强的损伤,所以消化的时间不能过长,建议使用合适浓度和pH值的消化酶,否则会导致细胞衰老和分化。
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