若您养的是贴壁细胞,请先将细胞消化下来;若是悬浮细胞,请直接按以下步骤进行:1. 以200-300g离心3分钟,收集细胞。2. 用BI冻存液将细胞重悬(不需回温),将细胞密度调整为3~5x106 cells/ml,添加到冻存管中(一般每管1ml)。3. 建议将含有细胞悬液的冻存管放进渐进降温盒或是保温杯中,置于-80°C冰箱6小时以上或是过夜(或不需要程序降温)。
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若您养的是贴壁细胞,请先将细胞消化下来;若是悬浮细胞,请直接按以下步骤进行:1. 以200-300g离心3分钟,收集细胞。2. 用BI冻存液将细胞重悬(不需回温),将细胞密度调整为3~5x106 cells/ml,添加到冻存管中(一般每管1ml)。3. 建议将含有细胞悬液的冻存管放进渐进降温盒或是保温杯中,置于-80°C冰箱6小时以上或是过夜(或不需要程序降温)。4. 将冻存管迅速移到液态氮中保存。5. 冻存24小时后,建议检测细胞存活率。
Dulbecco’s Modified Eagle Medium(DMEM)是目前常使用的改良式Eagle's培养基。DMEM与MEM含有相同的营养成分,但浓度高出2~4倍。主要用于生长的细胞,分低糖(1000mg/L)、高糖(4500mg/L)两种。DMEM含更高浓度的NaHCO3,要用10%的CO来平衡,当然也可以在较低CO浓度下使用。DMEM-高糖(标准型)更适合高密度悬浮细胞培养。适用于附着性较差,但又不希望它脱离原来生长点的培养,也可用于杂交瘤中瘤细胞和DNA转染的转化细胞的培养。
研究表明,通过创建细胞在体内所受的缺氧条件,大多数情况下细胞表达和形态与单纯二氧化碳控制条件下的细胞截然不同。这使得控制氧气环境对于评估临床应用的许多疗法和实验的可行性至关重要。一款性能可靠、可控制 O2 浓度的 CO2 培养箱是以上低氧研究的核心装备。Eppendorf 新款CellXpert C170i CO2培养箱的 O2% 浓度控制功能正式发布。
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