柱色谱为向玻璃管中填入固定相,以流动相溶剂浸润后在上方倒入待分离的溶液,再滴加流动相,因为待分离物质对固定相的吸附力不同,吸附力大的固着不动或移动缓慢,吸附力小的被流动相溶剂洗下来随流动相向下流动,从而实现分离。纸色谱以滤纸条为固定相,在纸条上点上待分离的混合溶液的样点,将纸条下端浸入流动相溶剂中悬挂,溶剂因为毛细作用沿滤纸条上升,样点中的溶质从而被分离。薄层色谱是在玻璃板上涂以固定相涂层,然后点
层析泵
柱色谱为向玻璃管中填入固定相,以流动相溶剂浸润后在上方倒入待分离的溶液,再滴加流动相,因为待分离物质对固定相的吸附力不同,吸附力大的固着不动或移动缓慢,吸附力小的被流动相溶剂洗下来随流动相向下流动,从而实现分离。纸色谱以滤纸条为固定相,在纸条上点上待分离的混合溶液的样点,将纸条下端浸入流动相溶剂中悬挂,溶剂因为毛细作用沿滤纸条上升,样点中的溶质从而被分离。薄层色谱是在玻璃板上涂以固定相涂层,然后点样,下端浸入溶剂,同样自下而上分离。常用于探索柱色谱实验条件,溶剂和固定相的选择等。常用固定相有石膏、氧化铝、蔗糖、淀粉等,常用流动相为水、等各种。如果在正常的使用状态下,色谱柱的性能开始下降,基线的信号值会。
漏液:
液相色谱仪从流动相瓶到废液瓶之间的流路是一个全封闭体系,内部压力很高,但外部却能保证一滴不漏。如果某个部件发生漏液,那就是故障所在。
漏液的原因分两种:
接触硬件不当:在更换零件如流路管或换柱时,换的接头接口不匹配,造成漏液。要注意不同公司的柱子接头很多是不同的,甚至同一家公司在不同时期生产的液相柱接头也有很大区别。当然选项用PEEK接头是一较好是一个较好的解决方法,不仅通用性好,而且靠手拧就能保证不漏液。即使是接口本身是匹配的,但是如果操作不当也会漏液,一种不当就是力度把握不好,拧得太紧或太松;试样的加入除另有规定外,将试样溶于层析时使用的流动相中,再沿色谱管壁缓缓加入。另一种不当就是致命的错误:滑丝,这往往是动手能力不太强,螺丝钉很少拧的工作者犯的错误,滑丝的后果不仅是漏液那么简单,常造成重要部件的报废。解决这个问题只能靠恶补基本功来实验,那就是拧螺丝。

国产液相色谱仪借助于HPLC(液相色谱)的理论及原理,涵盖了小颗粒填料、低系统体积、耐高压及检测手段等全新技术,增加了分析的通量、灵敏度及色谱峰容量。 国产液相色谱仪的应用范围: 可分析极性、弱极性或非极性的有机化合物,热稳定性差的化合物以及具有生物活性的生物分子。广泛应用于核酸、肽类、内酯、稠环芳烃、高聚物、、人体代谢产物、表面活性剂、杀虫剂、除莠剂等物质的定性和定量分析。例如、多环芳香化合物、甾体化合物、、色素、防腐剂、有机酸、维生素、糖类、蛋白质、氨基酸、肽、酶等,还可进行样品的纯化、手性的拆分等。在发生“堵”的现象后,就需要找出原因,主要是什么位置发生了“堵”。

液相色谱仪的常规操作及维修: 1、过滤流动相,根据需要选择不同的滤膜。 2、对抽滤后的流动相进行超声脱气10-20分钟。 3、打开HPLC工作站,连接好流动相管道,连接检测系统。 4、进入HPLC控制界面主菜单,点击manual,进入手动菜单。 5、有一段时间没用,或者换了新的流动相,需要先冲洗泵和进样阀。冲洗泵,直接在泵的出水口,用针头抽取。冲洗进样阀,需要在manual菜单下,先点击purge,再点击start,冲洗时速度不要超过10ml/min。 6、调节流量,初次使用新的流动相,可以先试一下压力,流速越大,压力越大,一般不要超过2000。点击injure,选用合适的流速,点击on,走基线,观察基线的情况。 7、设计走样方法。点击file,选取se-lectusersandmethods,可以选有的各种走样方法。若需建立一个新的方法,点击newmethod。选取需要的配件,包括进样阀,泵,检测器等,根据需要而不同。选完后,点击protocol。一个完整的走样方法需要包括:a、进样前的稳流,一般2-5分钟;b、基线归零;c、进样阀的loading-inject转换;将色谱柱连接于进样口上色谱柱在进样口中插入深度根据所使用的GC仪器不同而定。d、走样时间,随不同的样品而不同。 8、进样和进样后操作。选定走样方法,点击start。进样,所有的样品均需过滤。方法走完后,点击trun,可记录数据和做标记等。全部样品走完后,再用上面的方法走一段基线,洗掉剩余物。 9、关机时,先关计算机,再关液相色谱。

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