武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年,是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司;公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原核蛋白表达平台、日化产品生产平台;可以开展各类动、植物、细菌、细胞等生物实验。因此,本试验以洋葱作为试材,以为硒源,通过土壤施硒、叶面喷硒、硒浸根三种处理方式研究施硒量和施硒方法对洋葱生
洋葱亚细胞定位培养
武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年,是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司;公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原核蛋白表达平台、日化产品生产平台;可以开展各类动、植物、细菌、细胞等生物实验。因此,本试验以洋葱作为试材,以为硒源,通过土壤施硒、叶面喷硒、硒浸根三种处理方式研究施硒量和施硒方法对洋葱生长发育和物质、洋葱体内硒含量和硒形态的影响。
目的研究1个白木香倍半萜合酶(ASS)的亚细胞定位,确定其功能区域,并比较3种瞬时表达体系在亚细胞定位研究中的优劣。结果显示,真空渗透法和直接注射法在瞬时表达效率上差异不大,真空渗透操作上更简便、更易掌握。方法从白木香愈伤组织中提取总RNA,采用特异引物RT-PCR方法倍半萜合酶ASS基因,并连接于pEZS-NL载体和pFGC5941GFP改造载体上,分别构建pFGC5941-GFP-ASS、pEZS-NL-ASS-GFP 2种植物表达载体,分别利用根癌农侵染叶片、基因枪轰击洋葱表皮细胞、PEG转化白木香原生质体3种技术进行瞬时转化表达,激光共聚焦显微镜下观察表达出的绿色荧光蛋白(GFP)融合蛋白的亚细胞定位。结果在叶片表皮细胞、洋葱表皮细胞及白木香原生质体中,融合蛋白绿色荧光均能被观察到。ASS基因与GFP的融合蛋白产物在叶片中定位于胞质,在洋葱表皮中定位于胞质和细胞核,白木香原生质体中定位于胞质和质体。结论 ASS基因在白木香原生质体胞质及质体定位;对3种体系的结果比较表明,应用不同体系研究蛋白的亚细胞定位可能出现不同的结果,这可能与同源或异源表达的植物细胞的特性有关。
武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年,是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司;公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原核蛋白表达平台、日化产品生产平台;可以开展各类动、植物、细菌、细胞等生物实验。但是马铃薯是同源四倍体,遗传分离复杂,加之高淀粉、低还原糖和低温下不糖化的育种材料有限,故运用常规育种方法培育淀粉含量高、低还原糖和抗低温糖化的优良品种难度极大。
胞质Ca~(2+)是重要的第二信使,通过Ca~(2+)结合蛋白产生磷酸化信号级联,调控下游基因表达。钙依赖而钙调素不依赖的蛋白激酶(calcium-dependent/calmodulin-independentprotein kinases,CDPKs)是一类仅在植物和部分原生生物中存在的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,在钙信号转导中具有重要功能。通过气相色谱法对其胞内脂肪酸组成进行分析后发现,毕赤酵母含有C16:1、C17:1、C18:1三种单不饱和脂肪酸和亚油酸(LA,C18:2)、α-亚麻酸(ALA,C18:3)两种多。越来越多的证据表明,CDPKs广泛参与植物生长发育、病原防御、非生物环境胁迫等生理反应的信号传递过程。目前在水稻中已发现31个CDPKs基因,但功能明确的只有少数几个基因,本研究的目的就是利用超量表达和RNA干涉(RNA interference,RNAi)技术分析水稻OsCPK2、OsCPK15和OsCPK29的功能,为利用基因工程技术培育水稻新品种提供新的基因资源和理论指导。本研究的主要试验结果如下: 1.通过RT-PCR方法检测了OsCPK2、OsCPK15和OsCPK29三个基因在粳稻品种日本晴分蘖期的根、成熟叶片、穗尖至剑叶叶枕距离分别为0 cm、0-1cm、1-3 cm、3-5 cm、5-8 cm、8-12 cm、12-16 cm、16-20 cm、20-25 cm、25-30 cm、灌浆期稻穗(命名为P1-P12)中的表达谱。试验结果显示:OsCPK2和OsCPK29时期稻穗中表达量较高,在成熟叶片和P12时期稻穗中表达量很低,在分蘖期的根和幼穗中不表达;而OsCPK15在所检测的各个组织和时期中表达量均很高。
武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年,是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司;公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原核蛋白表达平台、日化产品生产平台;可以开展各类动、植物、细菌、细胞等生物实验。适量补硒有增强机体,延缓衰老,的效果,因此硒被誉为“生命的元素”和“”。
由稻瘟菌(Magnaporthe grisea)引起的稻瘟病是重要的水稻病害之一。以研究稻瘟菌致病基因为中心,探讨致病相关基因的种类及其功能,生理小种和致病基因的关系,致病基因的遗传分离和在群体中的转移规律等等,能够为水稻抗瘟性研究和稻瘟病化学防治、生物防治提供理论基础。天然存在的蔗果寡糖是由微生物或植物中具有果糖基转移活性的酶作用而产生的。 本研究利用在实验室已经建成的根癌农介导的稻瘟菌T-DNA插入突变体库,挑选了7个致病力缺陷的突变体,提取基因组DNA,PCR检测确认T-DNA的插入。利用DW-ACP-PCR(DNA Walking-Annealing Control Primer-PCR)技术对T-DNA右边界侧翼序列进行扩增,7个突变体都获得了特异条带。对这些特异条带进行并测序,其中5个测序成功,另外2个测序失败。将成功的序列与稻瘟菌基因组和NCBI数据库比对,发现1个为载体pCAMBIA1300序列,4个与稻瘟菌的基因组相似性达93%~99%,认为是T-DNA插入位点的侧翼序列。
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