发酵罐排气过滤器的维护与保养
进口小型全自动发酵罐一般带有排气过滤器,这一方面是为了防止带菌的气溶胶污染大气,另一方面可以预防噬菌体(因为活菌细胞排到大气中很容易招来噬菌体)。但是,这种排气过滤器容易被培养基的泡沫污染,影响发酵过程的通气率。有些人为此把排气过滤器拆除,其实是因噎废食,并不可取。
要防止排气过滤器被泡沫污染,首先要控制好培养基灭菌时的泡沫。
光合菌发酵罐
发酵罐排气过滤器的维护与保养
进口小型全自动发酵罐一般带有排气过滤器,这一方面是为了防止带菌的气溶胶污染大气,另一方面可以预防噬菌体(因为活菌细胞排到大气中很容易招来噬菌体)。但是,这种排气过滤器容易被培养基的泡沫污染,影响发酵过程的通气率。有些人为此把排气过滤器拆除,其实是因噎废食,并不可取。
要防止排气过滤器被泡沫污染,首先要控制好培养基灭菌时的泡沫。由于小型发酵罐灭菌时相对于大型发酵罐蒸汽通量大,泡沫更容易发生,因此我们在灭菌前要适当多加一些消沫剂,灭菌时要严格控制蒸汽通入量。一般来说,灭菌初始时在确保蒸汽流通的前提下要尽量把蒸汽阀门开小一些,如果发现升温慢,再逐渐开大阀门,这样就可以避免产生大量泡沫。如果一开始就把蒸汽阀门开得很大,泡沫上来后就会措手不及,难以控制。这时应把所有进、排气阀门都关闭,然后在密切监视泡沫的同时缓慢打开排气阀门泄压,待表压降到接近于零后再重新缓慢通入蒸汽灭菌。
对于在发酵过程中产生的泡沫,要加强观察,特别是发酵前期和后期泡沫产生较快时,如果发现自动消沫装置不足以很快消除泡沫,就要手动加入消沫剂。即使没有排气过滤器,从保护发酵罐搅拌轴封和防止染菌方面考虑,也同样要在灭菌和发酵过程中防止泡沫顶罐。
有效使用小型发酵罐以及发酵变化
如何有效使用小型发酵罐以及发酵过程的变化,如何我们经常使用到小型发酵罐来做各种科研实验,那么在操作中得到很好的利用是一个非常重要的课题,还有在发酵的过程中一些细微的变化。
小型发酵罐分批培养过程中大肠杆i菌的菌体生长状况,通过控制发酵过程的温度、溶氧、搅拌速度、空气流量、泡沫水平等参数,并每小时取样测OD值和还原糖量,制作菌体生长曲线,以此判断大肠杆i菌的生长发酵状况。结果表明大肠杆i菌在发酵的个小时处于生长延迟期,发酵3~6小时为对数生长期,发酵6小时后该菌开始进入平衡期,第8小时时结束发酵实验。
发酵罐是进行液体发酵的特殊设备。生产上使用的发酵罐容积大,均用钢板或不锈钢板制成;供实验室使用的小型发酵罐,其容积可从约1L至数百升或稍大些。一般来说,5L以下是用耐压玻璃制作罐体,10 L以上用不锈钢板或钢板制作罐体。发酵罐配备有控制器和各种电极,可以自动地调控试验所需要的培养条件,是微生物学、遗传工程、医i药工业等科学研究所必需的设备。
在当今市场上,各厂家生产的发酵罐会有所差别,但基本原理是相同的,基本结构是类似的。本实验使用的是BIOTECH-7BGZ发酵罐,其结构主要又罐体和控制器两大部分组成,罐体为一硬质玻璃圆筒,底和顶两端用不锈钢板及橡胶垫圈密封构成,容积为5L,顶盖上有多个孔口,分别是加料及接种口补料口、放置 DO(溶解氧)电极口、放置pH电极口、放置消泡电极口、放置取样管口等;本罐可配置不同性能的控制器,控制器能完成基本的功能。
发酵罐罐体的维护还有清洗和保养
发酵罐罐体的维护还有清洗和保养。那么在发酵罐罐体是可以直接与物料接触的场所,其中的表面光洁度的程度,以及内部构件的清洁度是被免染菌的主要因素。所以在每次发酵结束后,必须把顶盖连同搅拌一起垂直向上拆卸下来,把所有电极取下来,放在安全的地方。
用中性洗涤剂洗刷罐体及内部构件。(空气分布器清洗见无菌空气系统的维护)。在清洗的同时,应对罐及出口阀的一些O型密封圈进行检查,如发现永i久变形,老化,有划伤等现象,需及时更换。在清洗完毕,重新安装后,应对其外表面及罐架等用干净抹布擦干净,保证在待用的状态。如果发酵罐将长期不使用时,则取下所有的电极,按要求规定存放,然后把罐内的存水及所有管路的存水放光,关闭阀门,用防尘布保护发酵罐。
拌系统的维护 搅拌系统包括搅拌轴、搅拌器、机械密封、轴承、联轴器和电机等。由于是转动部件,而且往往是变速转动部件,周期也很长。所以在日常运转中应经常注意轴的运转情况,电机的发热情况以及异常噪声的发生,经常检查有关的螺栓是否松动。每年要定期检查机械密封的磨损情况。如有必要可更换动环,以保证机械密封的正常运转,避免不必要的染菌可能。
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