色谱分析法、层析法,是一种分离和分析方法,现代生物企业生产过程中的核心技术之一。在分析化学、有机化学、生物化学等领域有着非常广泛的应用。将溶剂入口管从过滤头和瓶盖组件处拨下,如果管线中充满溶剂,当过滤头性能良好时,溶剂会自由地从管中滴出.如果堵塞,就没有溶剂或只有很少量的溶剂从管中滴出。色谱法利用不同物质在不同相态的选择性分配,以流动相对固定相中的混合物进行洗脱,混合物中不同的物质会以不同的速度沿
液相色谱
色谱分析法、层析法,是一种分离和分析方法,现代生物企业生产过程中的核心技术之一。在分析化学、有机化学、生物化学等领域有着非常广泛的应用。将溶剂入口管从过滤头和瓶盖组件处拨下,如果管线中充满溶剂,当过滤头性能良好时,溶剂会自由地从管中滴出.如果堵塞,就没有溶剂或只有很少量的溶剂从管中滴出。色谱法利用不同物质在不同相态的选择性分配,以流动相对固定相中的混合物进行洗脱,混合物中不同的物质会以不同的速度沿固定相移动,终达到分离的效果。色谱理论:保留时间保留时间是样品从进入色谱柱到流出色谱柱所需要的时间,不同的物质在不同的色谱柱上以不同的流动相洗脱会有不同的保留时间,因此保留时间是色谱分析法比较重要的参数之一。保留时间由物质在色谱中的分配系数决定:tR = t0(1 + KVs / Vm)式中tR表示某物质的保留时间,t0是色谱系统的死时间,即流动相进入色谱柱到流出色谱柱的时间,这个时间由色谱柱的孔隙、流动相的流速等因素决定。K为分配系数,VsVm表示固定相和流动相的体积。这个公式又叫做色谱过程方程,是色谱学基本的公式之一。

“堵”的原因:不适当操作常见问题有以下几种:
(1)在更换零件时选择的型号有误,接口不是很匹配,在拧紧的时候产生变形而使得管路堵塞。
(2)样品处理液净化得不干净,长期会在六通阀和柱之间形阻塞不畅。
(3)在使用用手动六通阀时,有些人可能由于手劲小的原因,转动的不到位,于是造成流路形成死堵,压力升高超过警戒值。
(4)在使用金属管路作出废液管时,应当注意废液瓶中先放一些水,并把废液管的出口端结晶成块并造成堵塞。这种情况不常见,但却的确发生过。
液相色谱仪是一种非常常见的仪器,它能够检测出各种不同的液体,还能够测试出它们的成分,这些不同成分的液体在进入仪器之后会呈现出不同的状态,机器在进行运作之后就能够根据状态测试出它们的成分了。这也是我们常说的液相色谱仪至少一周要开机一次的原因(我们做液相一定要有“微渗”的概论)。现在液相色谱仪已经得到了广泛的应用,它的主要原理就是液相色谱测试,根据这个原理能够得到非常详细的测试内容。液相色谱仪有很多的优势,在使用的时候我们会发现它的这些优势,下面我们就一起来看看液相色谱仪在使用上具有哪些优势以及购买时有哪些小技巧?使用优势: 液相色谱仪的个优势就是它可以在高压的环境下使用,液体在进入一起之后是保持原状态的,这个时候载液流速比较快,受到的阻力非常的大,为了能够及时的通过色谱柱,这个时候必须要对载液加上一定的高压,液相色谱仪本身具有高压的功能,所以在加进去之后能够让载液产生一定的高压作用。
随着柱填料的发展,反相色谱法的应用范围逐渐扩大,现已应用于某些无机样品或易解离样品的分析。柱色谱法(Columnchromatography)所用色谱管为内径均匀、下端缩口的硬质玻璃管,下端用棉花或玻璃纤维塞住,管内装有吸附剂。为控制样品在分析过程的解离,常用缓冲液控制流动相的pH值。但需要注意的是,C18和C8使用的pH值通常为2.5~7.5(2~8),太高的pH值会使硅胶溶解,太低的pH值会使键合的脱落。有报告新商品柱可在pH 1.5~10范围操作。
正相色谱法与反相色谱法比较表
正相色谱法 反相色谱法
固定相极性 高~中 中~低
流动相极性 低~中 中~高
组分洗脱次序 极性小先洗出 极性大先洗出

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