本试剂盒利用竞争酶联免l疫分析方法来测定细胞提取物或体外腺苷酸环化酶实验中的cAMP的水平。简而言之，将羊抗鼠多克l隆抗l体包被在酶标板上，细胞提取物或体外腺苷酸环化酶实验中的cAMP与固定数量的偶联辣根过氧化物酶的cAMP或碱性磷酸酶竞争性的结合抗cAMP单克l隆抗l体，已知的cAMP作为标准品来做标准曲线。经过一段时间孵育，洗掉所有试剂，加入底物进行显
cGMP kit
本试剂盒利用竞争酶联免l疫分析方法来测定细胞提取物或体外腺苷酸环化酶实验中的cAMP的水平。简而言之，将羊抗鼠多克l隆抗l体包被在酶标板上，细胞提取物或体外腺苷酸环化酶实验中的cAMP与固定数量的偶联辣根过氧化物酶的cAMP或碱性磷酸酶竞争性的结合抗cAMP单克l隆抗l体，已知的cAMP作为标准品来做标准曲线。经过一段时间孵育，洗掉所有试剂，加入底物进行显色。将多孔板置于酶标l仪上，于450nm或405nm波长下，进行读数。黄色的光强度与样品中cAMP的浓度呈反比关系。基于cAMP标准品所得曲线，通过测得的光密度可以计算出样品中cAMP的浓度。
试剂盒组成材料和试剂
1. 羊抗小鼠IgG包被的96孔微孔板一张 catalog No.30101
该微孔板将特异性识别小鼠IgG 的山羊抗l体包被于可拆分酶标条上。
2. cAMP偶联的辣根过氧化物酶工作液6 mL catalog No. 30102
本包装含1000×偶联酶储存液和稀释缓冲液。
3. 抗cAMP的小鼠单克l隆抗l体工作液6 mL catalog No. 26002-2
本包装含1000×抗l体储存液和稀释缓冲液。
注意：为了稳定和长效的实验，抗l体储存于-80℃。在使用前将6μL 1000×偶联酶储存液加入到6 mL 稀释缓冲液中配制为工作液，并轻轻混匀。工作液请避免反复冻融。
4. 中和液6 mL catalog No. 30103
5. 10×浓缩洗涤液15 mL catalog No. 30103
含去污剂的磷酸盐缓冲液。
6. cAMP标准品0.25 mL catalog No. 30203
浓度5000 pmol/ mL
7. 显色底物A，12 mL catalog No. 30107
8. 显色底物B, 12 mL。 catalog No. 30108
9. 终止液，6 mL； catalog No. 30110
注意：该溶液有腐蚀性；储存时请旋紧瓶盖
灵敏度
通过比较10个B0孔平均光密度值(OD)和10个5号管标准品的平均光密度值，计算出灵敏度。cAMP浓度的检测极限通过标准曲线上0位置的两个标准偏差来测定。
OD(B0平均数) =0.685± 0.003
OD（5号 标准品平均数）=0.604± 0.010
光密度偏差(0-0.4 pmol/mL) =0.081
2 SD's of the Zero Standard =0.006
灵敏度 =081.0006.0/0.8×0.4 pmol/mL =29.6 fmol/mL
因此为筛选出腺苷酸环化酶的激l活剂或磷酸二酯酶的抑制l剂，需要一个高敏感度、特异性的、可重复的方案用于检测cGMP的含量。考虑到大分子的化合物可能存在较弱的影响，这一个初筛是有必要的。
目前商业化提供的一些cGMP检测试剂盒主要使用的是非亲和纯化的cGMP多克l隆抗l体。尽管据称有特异性，但这些多克l隆抗cGMP抗l体与cAMP和GTP呈现一定程度的交叉反应。且在大多数细胞类型中，cGMP含量cAMP 100倍。
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