武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年,是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司;公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原核蛋白表达平台、日化产品生产平台;可以开展各类动、植物、细菌、细胞等生物实验。脂肪族昔(aliphaticglucosinolates,AGSL)是一种广泛存在于十字花科植物中的含氮、含
洋葱亚细胞定位培养
武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年,是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司;公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原核蛋白表达平台、日化产品生产平台;可以开展各类动、植物、细菌、细胞等生物实验。脂肪族昔(aliphaticglucosinolates,AGSL)是一种广泛存在于十字花科植物中的含氮、含硫的植物次生代谢产物,其降解产物(如萝卜硫素)不仅在植物防御、响应生物或非生物胁迫的生理过程中具有重要的作用,而且还具有极强的活性。
目的研究1个白木香倍半萜合酶(ASS)的亚细胞定位,确定其功能区域,并比较3种瞬时表达体系在亚细胞定位研究中的优劣。方法从白木香愈伤组织中提取总RNA,采用特异引物RT-PCR方法倍半萜合酶ASS基因,并连接于pEZS-NL载体和pFGC5941GFP改造载体上,分别构建pFGC5941-GFP-ASS、pEZS-NL-ASS-GFP 2种植物表达载体,分别利用根癌农侵染叶片、基因枪轰击洋葱表皮细胞、PEG转化白木香原生质体3种技术进行瞬时转化表达,激光共聚焦显微镜下观察表达出的绿色荧光蛋白(GFP)融合蛋白的亚细胞定位。将成功的序列与稻瘟菌基因组和NCBI数据库比对,发现1个为载体pCAMBIA1300序列,4个与稻瘟菌的基因组相似性达93%~99%,认为是T-DNA插入位点的侧翼序列。结果在叶片表皮细胞、洋葱表皮细胞及白木香原生质体中,融合蛋白绿色荧光均能被观察到。ASS基因与GFP的融合蛋白产物在叶片中定位于胞质,在洋葱表皮中定位于胞质和细胞核,白木香原生质体中定位于胞质和质体。结论 ASS基因在白木香原生质体胞质及质体定位;对3种体系的结果比较表明,应用不同体系研究蛋白的亚细胞定位可能出现不同的结果,这可能与同源或异源表达的植物细胞的特性有关。
武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年,是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司;公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原核蛋白表达平台、日化产品生产平台;可以开展各类动、植物、细菌、细胞等生物实验。生物信息学分析显示,ScBG1基因DNA序列全长1175bp,编码332个氨基酸,含有1个长度为156bp的内含子。
大豆是重要的油料作物和植物蛋白质资源,在食品工业和农业生产中占有重要地位。大豆花叶病毒病分布非常广泛,是一种世界害,它严重影响大豆产量和外观。目前主要通过适当改变播种时期、选用抗病品种、防蚜等措施来降低大豆花叶病毒(SMV)对大豆产量的影响,国内外从遗传工程角度来探索抗SMV途径的还很少。类甜味蛋白(Thaumatin-like proteins,TLP)是第5类植物病程相关蛋白,在离体条件下具有很强的抑菌活性。在此基础上,利用根癌农介导的大豆子叶节转化法进行GmNHX1基因的遗传转化。以往关于类甜味蛋白的抗病研究都限于抗真菌,本研究探讨了其与花叶病毒抗性之间的相关性。GmTLP是本研究从大豆品种科丰1号中利用SMV诱导的双向电泳技术分离的类甜味蛋白编码基因,在大豆中存在两个拷贝,分别命名为GmTLP1和GmTLP2。本文对GmTLP1在植物中的表达及功能进行了初步研究。研究结果如下:1实时荧光定量PCR结果显示,在SMV诱导4h、8h、24h、48h时,GmTLP1基因在转录水平上的表达量明显上升,说明在mRNA水平上该基因是响应SMV诱导的,并且响应模式为双峰模式。 2半定量RT-PCR结果显示,GmTLP1在大豆根、茎、叶、荚中均有表达,只是荚中表达量相对低一些。3构建绿色荧光蛋白融合表达载体,利用根癌农法转化洋葱表皮细胞进行瞬时表达。
武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年,是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司;公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原核蛋白表达平台、日化产品生产平台;可以开展各类动、植物、细菌、细胞等生物实验。但是马铃薯是同源四倍体,遗传分离复杂,加之高淀粉、低还原糖和低温下不糖化的育种材料有限,故运用常规育种方法培育淀粉含量高、低还原糖和抗低温糖化的优良品种难度极大。
实验室前期研究表明,将来自水稻黄单胞菌(Xanthomonas oryzae pv. oryzae)的Harpin蛋白编码基因hrf1转化水稻,获得的转基因株系NJH12能够提高对水稻稻瘟病、水稻白叶枯病和干旱的抗性。对NJH12表达芯片进行分析,筛选出大量与受体植株有显著差异表达的基因。 OsSsrl (Oryza sativa L. salt-sensitive related gene1, GeneBank登录号为NM_001065574)是NJH12表达谱中的一个表达量上调基因,为了进一步分析其序列特征、启动子序列、亚细胞定位及在水稻不同组织和各种逆境胁迫下的表达模式,通过生物信息学手段、洋葱表皮亚细胞定位和Real-Time PCR对其进行研究。钙依赖而钙调素不依赖的蛋白激酶(calcium-dependent/calmodulin-independentproteinkinases,CDPKs)是一类仅在植物和部分原生生物中存在的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,在钙信号转导中具有重要功能。序列分析表明OsSsr1的开放阅读框为2004bp,编码一个由667个氨基酸组成并含有5个跨膜区的蛋白,该蛋白N端含有一个信号肽。其启动子序列包含TGACG-motif、ABRE、 TCA-element、Box-W1、W box和Box S等多个与胁迫相关的顺式作用元件。GFP融合表达显示,OsSsrl蛋白定位于细胞膜。Real-Time PCR结果表明,OsSsrl基因在水稻不同不同组织中均有表达,在叶部的表达量,其次为根,在幼穗中的表达量;OsSsrl表达水平受干旱、高温、高盐、低温、机械伤害、稻瘟病菌、MeJA和ABA的诱导上调。
武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年,是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司;公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原核蛋白表达平台、日化产品生产平台;可以开展各类动、植物、细菌、细胞等生物实验。N素供应对甜瓜的生长发育、果实的产量和形成有非常重要的影响,目