这些抗Arf 6-GTP单克l隆抗l体还可用于通过免l疫组织化学监测细胞和组织中Arf 6的激l活。
NewEast Biosciences Arf6激l活测定试剂盒提供了一种简单且的方法来监测Arf 6的激l活。每个试剂盒均提供足够的量以执行20个测定。
NewEast Biosciences Arf 6激l活检测试剂盒
IP-WB活性检测试剂盒
这些抗Arf 6-GTP单克l隆抗l体还可用于通过免l疫组织化学监测细胞和组织中Arf 6的激l活。
NewEast Biosciences Arf6激l活测定试剂盒提供了一种简单且的方法来监测Arf 6的激l活。每个试剂盒均提供足够的量以执行20个测定。
NewEast Biosciences Arf 6激l活检测试剂盒基于特定于配置的抗Arf 6-GTP单克l隆抗l体,可从细胞提取物或体外载有GTPγS的Arf 6激l活检测方法来测量活性Arf 6-GTP水平。 简而言之,抗活性的Arf 6小鼠单克l隆抗l体将与含有Arf 6-GTP的细胞裂解液一起孵育。 然后,结合的活性Arf 6将被蛋白A / G琼脂糖拉低。 分别使用抗Arf 6兔多克l隆抗l体通过免l疫印迹分析检测沉淀的活性Arf 6。
Arf样蛋白1(Arl1)是GTpases的Ras超家族中的调控性GTPases Arf家族的成员,并且在整个真核生物中都具有高度保守的直系同源基因。 Arl1对果蝇和秀丽隐杆线虫的早期胚胎发育至关重要。 Arl1在主要序列,细胞定位和功能(膜运输调节)上与Arf1-6较相似,甚至共享几个共同的结合伴侣。 除了其在高尔基体/反式高尔基体网络中的膜运输功能中,还有报道表明Arl1在酵母中的离子稳态中可能发挥作用。
Arf6激l活测定。 经GDP(lane1)或GTPγS(lane 2)处理后,纯化的Arf6蛋白被免l疫沉淀。 用抗活性Arf6单克l隆抗l体进行免l疫沉淀。
试剂盒成分
特异性识别Cdc42活性构象的鼠单克l隆抗l体(Anti-active Cdc42, Mouse MonoclonalAntibody (Catalog No. 26905)):小管装--30ul (抗l体浓度是1mg/ml),抗l体溶于PBS(pH7.4)并包含50%的甘油和0.05%的叠氮l化钠。此抗l体可以特异性识别所有脊椎动物中的Cdc42-GTP。
Protein A/G agarose (Catalog No. 30301) :小管装—400ul包含200ul Protein A/G agarose 和200ul 20%乙醇溶液。(使用时溶液需要充分混匀,再吸取)
5X Assay/Lysis Buffer (Catalog No. 30303):小瓶装—30mL包含250 mM Tris-HCl (pH 8.0), 750 mM NaCl, 50 mM MgCl2, 5 mM EDTA, 5% Triton X-100。
特异性识别Cdc42活性构象的兔多克l隆抗l体(Anti-Cdc42, Rabbit Polyclonal Antibody (Catalog No.21010)):小管装--30ul (抗l体浓度是1mg/ml),抗l体溶于PBS(pH 7.4)并包含有 50%的甘油。
100 X GTPγS (Catalog No. 30302) :小管装—100ul (10 mM) ,实验中0.5mL细胞裂解液使用 5ul GTPγS标记。
100 X GDP (Catalog No. 30304) :小管装—100ul (100 mM) ,实验中0.5mL细胞裂解液使用5ul GDP标记。
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