Arf样蛋白1(Arl1)是GTpases的Ras超家族中的调控性GTPases Arf家族的成员,并且在整个真核生物中都具有高度保守的直系同源基因。 Arl1对果蝇和秀丽隐杆线虫的早期胚胎发育至关重要。 Arl1在主要序列,细胞定位和功能(膜运输调节)上与Arf1-6较相似,甚至共享几个共同的结合伴侣。 除了其在高尔基体/反式高尔基体网络中的膜运输功能中,还有报道表明
Rab7-GTP
Arf样蛋白1(Arl1)是GTpases的Ras超家族中的调控性GTPases Arf家族的成员,并且在整个真核生物中都具有高度保守的直系同源基因。 Arl1对果蝇和秀丽隐杆线虫的早期胚胎发育至关重要。 Arl1在主要序列,细胞定位和功能(膜运输调节)上与Arf1-6较相似,甚至共享几个共同的结合伴侣。 除了其在高尔基体/反式高尔基体网络中的膜运输功能中,还有报道表明Arl1在酵母中的离子稳态中可能发挥作用。
Arf6激l活测定。 经GDP(lane1)或GTPγS(lane 2)处理后,纯化的Arf6蛋白被免l疫沉淀。 用抗活性Arf6单克l隆抗l体进行免l疫沉淀。
当前没有直接测定法来测量Arl1 GTPases的激l活。
NewEast Biosciences Arl1激l活检测试剂盒基于特定于配置的单克l隆抗l体,该抗l体特异性识别Arl1-GTP,但不能识别Arl1-GDP。 鉴于单克l隆抗l体对其抗原的高度亲和力,可以在短时间内进行激l活测定。 该测定法可提供可靠的结果,并具有一致的可重复性。
检测步骤
Ι。活性Cdc42 Pull-Down实验
1. 等分0.5-1 mL的细胞裂解物至微量离心管中。
2. 向管中加入1mL的1X Assay/Lysis 缓冲液。
3. 向管中加入1ul的活性Cdc42单克l隆抗l体。
4. 用涡旋振荡仪将protein A/G凝胶柱充分混匀,然后的吸出20ul悬浮珠浆液加入离心管中。
5. 将管置于4°C条件下孵育1H,并轻轻的进行摇动。
6. 5000g,离心1分钟。
7. 弃上清,这一步要非常小心以避免珠子的损失。
8. 用0.5 mL的1X Assay/Lysis缓冲液洗涤珠子三次,离心并弃去上清。
9. 后一次洗涤后,小心的移去所有的上清。
10. 用20ul的2X SDS-PAGE样品缓冲液重悬样品。
11. 样品煮沸5min。
12. 5000g,离心10s。
GTPases的Rab家族调节真核水泡膜运输。 Rab35与两个血浆
膜和内体定位,并涉及到包括T细胞受体回收,卵母细胞卵黄蛋白回收和胞质分裂在内的各种过程。 Rab35调节神经元样细胞中的神经突生长,并可以诱导突起。
当前没有直接测定法来测量Rab35 GTPases的活化。
NewEast Biosciences Rab35激l活检测试剂盒基于特定于配置的单克l隆
特异性识别Rab35 GTP而不识别Rab Rab35 GDP的抗l体。鉴于...的高度亲和力
抗原的单克l隆抗l体,可以在短时间内进行激l活测定。这个
分析提供了可靠的结果,并具有一致的可重复性。
这些抗Rab35 GTP单克l隆抗l体也可以用于监测大鼠Rab35的激l活。
1细胞和组织中的免l疫组织化学。
NewEast Biosciences Rab35激l活检测试剂盒提供了一种简单的方法来监测
Rab35的激l活。每个试剂盒均提供足够的量以执行20个测定。
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