结果计算
样品中cAMP浓度有多种计算方法。X轴表示cAMP标准品浓度,Y轴表示净光密度的平均值或者百分比值。
1 样品和标准品的净光密度(OD)平均值的计算:
净OD平均值 = OD平均值 - NSB孔OD平均值
2 计算不同梯度浓度标准品的结合率占较大结合率(B0孔)的百分比,计算公式 如下:
百分比值 = (净OD平均值/ B0
Mouse cGMP kit

结果计算
样品中cAMP浓度有多种计算方法。X轴表示cAMP标准品浓度,Y轴表示净光密度的平均值或者百分比值。
1 样品和标准品的净光密度(OD)平均值的计算:
净OD平均值 = OD平均值 - NSB孔OD平均值
2 计算不同梯度浓度标准品的结合率占较大结合率(B0孔)的百分比,计算公式 如下:
百分比值 = (净OD平均值/ B0孔OD平均值)×100
3 绘制净OD平均值或百分比值对cAMP标准品浓度的Logit-Log曲线。通过插值即可得到样品中cAMP浓度。
武汉纽斯特生物科技有限公司(WuhanNewEastBiotechonologyCo.Ltd),系美国生命科学试剂供应商美国NewEastBio在的子公司。公司位于武汉东湖高新技术开发区光谷生物城.美国NewEastBio专注于生命科学和生物技术领域,主要产品有小分子、ELISA试剂盒、蛋白等,与世界高校和研究所、世界大制药公司、生物科技公司和医院等客户建立了长期稳定的合作关系,产品销往。

试剂准备
非乙酰化cGMP标准品将5000 pmol/mL cGMP标准品溶液平衡至室温。从#1至#7标记六只洁净试管。移取475μL 0.1M HCl到#1号试管,400μL到#2至#7号试管。加入25μL 5000 pmol/mL cGMP标准品到#1管中,剧烈涡旋震荡。从#1管中取出100μL溶液至#2管中,涡旋震荡。以此类推,重复上步操作,梯度稀释至#7管。
经以上操作,#1至#6管中cGMP标准品浓度分别为250,50,10,2,0.4,0.08和0.016 pmol/mL(详见cGMP加样表)。稀释过的标准品需在30分钟内使用。
标记一只试管作为无标准品空白对照(NSB)。移取600μL 0.1M HCl到NSB管中。
洗涤液将15 mL 10×洗涤液储液加到135 mL去离子水中,稀释成工作液。稀释液可在室温保存至试剂盒有效期限,或者3个月。
ELISA检测试剂盒应用定性夹心免l疫检测技术,用合成的HEV多肽抗原包被微孔板板条,这些多肽是型HEV毒株核心氨基酸序列中抗原性很强的肽段,分别来自于该毒株的开放阅读框2和开放阅读框3。将样品或标准品加入孔中并孵育,如果其中存在HEV IgM抗l体,这些抗l体就会与HEV 的多肽抗原结合,并固定在上面,洗板除去其它非特异性抗l体和样品中的其它成份。然后加入羊抗人IgM-HRP(辣根过氧化物酶)酶结合物,经第二次孵育后,酶结合物就会与头一次孵育结合上的HEV IgM抗l体相结合,洗板除去未结合的酶结合物,加入TMB底物溶液,在第三次孵育时会发生酶-底物反应,只有那些含有HEV IgM抗l体和酶结合物所形成的复合物的孔才会发生颜色变化,加入硫酸溶液终止酶和底物间的反应,并在波长: 450nm处测量O.D.值,按照本HEV IgM抗l体elisa试剂盒的测试标准, O.D.值大于或等于Cut-Off值的样品被认为是初试阳性。
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